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更新時間:2021-07-09 10:09:57瀏覽次數(shù):481次
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Human NRG1-beta1 ELISA Kit
Human NRG1-beta1 ELISA Kit樣品收集,、處理及保存方法:血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。檢測對象:人血清/血漿及相關(guān)液體實(shí)驗(yàn)方法:雙抗原夾心法進(jìn)行測
ELISA試劑分類: RD試劑盒,GBD試劑盒,,IBL試劑盒
2,、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
上海乾思生物科技代理**進(jìn)口試劑盒,,經(jīng)銷眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的ELISA試劑盒,生化試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品,,抗體,培養(yǎng)基,,血清,,為中國科研試劑供應(yīng)商之一,質(zhì)量被全國各大院??蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可,,
并為Elisa試劑盒長期供應(yīng)商.
上海乾思生物科技有限公司特別供應(yīng)進(jìn)口分裝elisa檢測試劑盒,規(guī)格48T/96T,,2-8℃保存,,快遞運(yùn)輸。上海乾思生物成立于2007年,,生產(chǎn)經(jīng)營進(jìn)口分裝的試劑盒產(chǎn)品,,有人試劑盒、大鼠試劑盒,、小鼠試劑盒,、雞試劑盒、鴨試劑盒,、豚鼠試劑盒,、牛試劑盒、兔子試劑盒,、羊試劑盒,、山羊試劑盒、綿羊試劑盒,、魚試劑盒,、豬試劑盒,,并且提供試劑盒代測技術(shù)服務(wù)等。
乾思生物科技有限公司
Shanghai biobaiye Biotech Co.,Ltd
供應(yīng)人elisa試劑盒,、大鼠elisa試劑盒,、小鼠elisa試劑盒、兔elisa試劑盒等,。標(biāo)本有:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊,、雞,、鴨、魚等,。
常用生化試劑作用:
1,、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,,在尿素和SDS中穩(wěn)定,。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2,。
2,、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),,因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,,并解離細(xì)胞中的核蛋白,,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3,、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,,所以它和乳糖一樣,,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,
使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,,四聚體解聚成單體,,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類,。與乳糖不同的是,
IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解,。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選,。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,。
4,、X-gal:5-溴-4-氯。
樣品收集,、處理及保存方法:血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。檢測對象:人血清/血漿及相關(guān)液體實(shí)驗(yàn)方法:雙抗原夾心法進(jìn)行測
ELISA試劑分類: RD試劑盒,GBD試劑盒,,IBL試劑盒
2,、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3,、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4、 保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
上海乾思生物科技代理**進(jìn)口試劑盒,,經(jīng)銷眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的ELISA試劑盒,生化試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品,,抗體,培養(yǎng)基,,血清,,為中國科研試劑供應(yīng)商之一,質(zhì)量被全國各大院??蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可,,
并為Elisa試劑盒長期供應(yīng)商.
上海乾思生物科技有限公司特別供應(yīng)進(jìn)口分裝elisa檢測試劑盒,規(guī)格48T/96T,,2-8℃保存,,快遞運(yùn)輸。上海乾思生物成立于2007年,,生產(chǎn)經(jīng)營進(jìn)口分裝的試劑盒產(chǎn)品,,有人試劑盒、大鼠試劑盒,、小鼠試劑盒,、雞試劑盒、鴨試劑盒,、豚鼠試劑盒,、牛試劑盒、兔子試劑盒,、羊試劑盒,、山羊試劑盒、綿羊試劑盒,、魚試劑盒,、豬試劑盒,并且提供試劑盒代測技術(shù)服務(wù)等,。
乾思生物科技有限公司
Shanghai biobaiye Biotech Co.,Ltd
供應(yīng)人elisa試劑盒、大鼠elisa試劑盒,、小鼠elisa試劑盒,。
注:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。 實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭,,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,,酶結(jié)合物或底物時,,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時間,,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性,。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用多道移液器加樣,。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度,。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,,同時要消除板底殘留的液體和手指印,,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆,。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),,以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差,;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液,。
6. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,,每隔10分鐘),如顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),,避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射,。
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,,請先稀釋后再測定,,計(jì)算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
洗板方法
1. 手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2. 自動洗板:如果有自動洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為縱坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),,OD值為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),,在對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析,,如curve expert 1.3,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度。
◇ 注意事項(xiàng):
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,,-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月。部分標(biāo)本需添加抑肽酶,。
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