人c-sis試劑盒
一,、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況,;
收到細(xì)胞未開封,,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
二,、如為貼壁細(xì)胞,,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作;然后打開蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,,放在離心管里,,然后瓶口過火(嚴(yán)禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,,再用10ml的移液管,,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了,。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細(xì)胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存,。
2. 超過80%匯合度時,,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1) 棄去培養(yǎng)液,,用3ml PBS(不含鈣,,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓分散,,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來,;
3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,,按要求分瓶,。
三、如為懸浮細(xì)胞,,吸出培養(yǎng)液,,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶,。
注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長不好,。
四、細(xì)胞出現(xiàn)問題,,可重發(fā)的情況有哪些,?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么,?
(1)細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,,細(xì)胞丟失,、破損、漏液等,,重發(fā),;
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,,重發(fā);
?。?)存活的細(xì)胞靜置24小時后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā),;
?。?)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,,重發(fā);
?。?)視具體情況而定,。
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細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)3個原則:1,、用自己的一套試劑,不要和別人混用,;2,、勤觀察細(xì)胞,像養(yǎng)寵物一樣喜愛和關(guān)心,;3,、有規(guī)律地?fù)Q液和傳代,不要“三天打魚,,兩天曬網(wǎng)”,。
質(zhì)量可靠,售后有保障
★我?guī)旒?xì)胞近3000種,來源于美國ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,。
凍存細(xì)胞時間為5-7個工作日,,活細(xì)胞為7-15個工作日。
★由于細(xì)胞庫現(xiàn)有細(xì)胞類目多,,為了不出現(xiàn)混亂錯誤,,需要了解相關(guān)細(xì)胞價格及詳細(xì)資料請老師,對您造成的不便還請見諒,!
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