大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體試劑盒

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大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體試劑盒細胞培養(yǎng)技術(shù)3個原則：1,、用自己的一套試劑,，不要和別人混用；2,、勤觀察細胞,，像養(yǎng)寵物一樣喜愛和關(guān)心；3,、有規(guī)律地換液和傳代,，不要“三天打魚，兩天曬網(wǎng)”,。
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凍存細胞時間為5-7個工作日,，活細胞為7-15個工作日。

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細胞實驗的基本操作
【細胞培養(yǎng)】
一,、細胞的復(fù)蘇：
非原代培養(yǎng)的細胞一般凍存于液氮之中，需要培養(yǎng)時要先從液氮中取出使之復(fù)蘇,。細胞復(fù)蘇的原則——快速融化：必須將凍存在－196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,，對細胞造成損害,。
具體操作如下：
1、實驗前準備：
1.1,、將水浴鍋預(yù)熱至37℃,，并將含10%FBS的培養(yǎng)液置于其中預(yù)熱；
1.2,、用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面,。
1.3、在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管,、吸管,、培養(yǎng)瓶等等。
2、取出凍存管及迅速解凍：
2.1,、根據(jù)細胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細胞的編號,。
2.2、從液氮罐中取出細胞盒,，取出所需的細胞,，同時核對管外的編號。
2.3,、迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化,，約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi),。
3,、平衡離心 將細胞懸液吸到離心管中，1000～1500rpm離心3分鐘,；
4,、制備細胞懸液 吸去上清液，加入10 ml培養(yǎng)液,，用吸管輕輕吹打均勻,，使細胞懸浮,；
5,、細胞計數(shù) 細胞濃度以5×105/ml為宜。
6,、培養(yǎng)細胞
將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液吸到培養(yǎng)瓶中,，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)（略微擰松培養(yǎng)瓶蓋），換液的時間由細胞情況而定,。通常,，除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感的細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）,， 在解凍之后， 可直接放入含有10-15ml（5－10倍）新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中,， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。