CAT#:51002315S/1002315W
PRODUCT NAME:COOH-PEG 5000Da 30 nm
SIZE:1 ml/5 ml
產(chǎn)品品牌:Nanoimmunotech
液體類標本：
標本必須為液體,，不含沉淀。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成，應再次離心,。
◇      血漿：
應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心,。
◇      尿液、胸腹水,、腦脊液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心。
◇      細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。
◇      組織標本：
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin,。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。

細胞培養(yǎng)問答:細胞計數(shù)及存活測試
1,、原理：
(1)計算細胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù)。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,，每個chamber中細刻9個1mm2大正方形，其中4個角落之正方形再細刻16個小格,，深度均為0.1mm,。當chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時,，計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細胞數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104,，即為每ml中之細胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會滲入死細胞中而呈色，而活細胞因細胞膜完整,，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料,，如果細胞不易吸收trypan blue，則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細胞活率：活細胞數(shù)/(活細胞數(shù)+死細胞數(shù))×,。計數(shù)應在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成,，隨時間延長，部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質(zhì)有很強的親和力,，用不含血清的稀釋液，可以使染色計數(shù)更為準確,。

　　,人T淋巴人T淋巴細胞,人淋巴細胞,人腎癌Wilms細胞,人胚胎成纖維細胞,人肺動脈平滑肌細胞,質(zhì)量可靠，售后有保障（編輯：tanxi）