CAT#:51010615Y/510106161
PRODUCT NAME:COOH-PEG 5000Da 20nm
SIZE:10 ml/20 ml
產(chǎn)品品牌:Nanoimmunotech
液體類標(biāo)本：
標(biāo)本必須為液體，不含沉淀,。包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測種類,。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      尿液,、胸腹水、腦脊液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí),，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin,。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。

細(xì)胞培養(yǎng)問答:開啟凍存管
1.準(zhǔn)備一個(gè)培養(yǎng)瓶,，加入適宜細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基，液體體積按照說明書的推薦配置,，并平衡培養(yǎng)基的溫度和pH（CO2）,?！?br/>2.在37℃水浴中或細(xì)胞的正常生長溫度下將凍存管輕輕搖動(dòng)。解凍要快,，約2分鐘或直到冰晶融化即可。
3.從水浴中取出凍存管并用浸泡或噴灑70%乙醇的方式來,。進(jìn)一步的操作均需在無菌操作臺(tái)中嚴(yán)格無菌條件下進(jìn)行,。
4.擰開凍存管的管帽并將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到一個(gè)含有9 ml推薦培養(yǎng)基的無菌離心管中,。通過溫和離心（125×g 10 min）除去冷凍保護(hù)劑（DMSO）。棄去上清,，并用1或2 ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。將這些細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中并輕輕搖動(dòng)以*混勻,。 5.培養(yǎng)24小時(shí)后檢查細(xì)胞狀態(tài)并在需要時(shí)進(jìn)行傳代。