產(chǎn)品貨號:TE1016
產(chǎn)品名稱:Human Leptin ELISA(Leptin)**
產(chǎn)品規(guī)格:96 Test
產(chǎn)品品牌:Quidel
液體類標本：
標本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
◇      細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
◇      組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS,，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin,。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,，如有必要，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。

細胞株

　液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,？還是冷凍好,？

　　要冷藏！,！因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年,。

人心臟成纖維細胞--胎兒心房 6340

細胞計數(shù)及存活測試
1、原理：
(1)計算細胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù),。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,，每個chamber中細刻9個1mm2大正方形，其中4個角落之正方形再細刻16個小格,，深度均為0.1mm,。當chamber上方蓋上蓋玻片后，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時,，計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細胞數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104,，即為每ml中之細胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會滲入死細胞中而呈色,，而活細胞因細胞膜完整，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料,，如果細胞不易吸收trypan blue，則用紅色之Erythrosin bluish。計算細胞活率：活細胞數(shù)/(活細胞數(shù)+死細胞數(shù))×100%,。計數(shù)應(yīng)在臺盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成,，隨時間延長，部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質(zhì)有很強的親和力,，用不含血清的稀釋液,，可以使染色計數(shù)更為準確。

細胞特性
在細胞培養(yǎng)之前,，我們要了解一下你所要養(yǎng)細胞的基本特性,，這點可以從細胞的產(chǎn)品說明書或者從ATCC細胞庫查詢。除此之外我們還要知道每管細胞的數(shù)量,，建議分裂或傳代的比例,，和已知細胞的傳代代次等信息。

人肺退行性癌細胞

準備培養(yǎng)基
復(fù)蘇細胞時需要準備合適的培養(yǎng)基,，血清和細胞生長所需的添加劑,。大部分培養(yǎng)細胞所用的培養(yǎng)體系，可以在訂購細胞系時獲得,。
雖然大多數(shù)細胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長,，但是當培養(yǎng)基改變時，細胞的性質(zhì)也會變化,。因此,，使用細胞庫推薦的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞會獲得的效果。

開啟凍存管

1.準備一個培養(yǎng)瓶,，加入適宜細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,，液體體積按照說明書的推薦配置，并平衡培養(yǎng)基的溫度和pH（CO2）,?！?br/>2.在37℃水浴中或細胞的正常生長溫度下將凍存管輕輕搖動。解凍要快,，約2分鐘或直到冰晶融化即可,。
3.從水浴中取出凍存管并用浸泡或噴灑70%乙醇的方式來消毒。進一步的操作均需在無菌操作臺中嚴格無菌條件下進行,。
4.擰開凍存管的管帽并將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到一個含有9 ml推薦培養(yǎng)基的無菌離心管中,。通過溫和離心（125×g 10 min）除去冷凍保護劑（DMSO）。棄去上清,，并用1或2 ml*培養(yǎng)基重懸細胞,。將這些細胞懸液轉(zhuǎn)移到含有*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中并輕輕搖動以*混勻。
5.培養(yǎng)24小時后檢查細胞狀態(tài)并在需要時進行傳代,。

人腎小球系膜細胞

 培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響

　　由于,，大多數(shù)細胞適宜pH為7.2~7.4,，偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細胞對pH的要求也不*相同,，原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,，無限細胞系耐受力強。

　　但總體來說,，細胞耐酸性比耐堿性強一些,，偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。因此,，我們在配制培養(yǎng)用液時,，可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時,，溶液的pH還會向上浮動0.2左右,。

　　質(zhì)量可靠，售后有保障（編輯：tanxi）