C8 優(yōu)質試劑盒

產品貨號:A406/A708
產品名稱:C8 優(yōu)質試劑盒
產品規(guī)格:250 µL
產品品牌:Quidel
參考價格(美元):254/249
液體類標本：
標本必須為液體，不含沉淀,。包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類,。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清,。如有沉淀形成,，應再次離心。
◇      血漿：
應根據試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應再次離心,。
◇      尿液,、胸腹水、腦脊液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成,，應再次離心,。
◇      細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。
◇      組織標本：
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),。用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存,，如有必要,，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。

人內臟脂肪細胞細胞株

　　Q1. 人內臟脂肪細胞液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好,？

　　要冷藏?。∫驗橐后w培養(yǎng)基經冷凍后再經溶化時,，其溶液的pH值會發(fā)生改變,，溶液往往變堿，某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利,。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。

人口腔表皮樣癌細胞

　　Q2.人內臟脂肪細胞 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,，及使用方法,。

　　幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求，細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質，在缺少谷氨酰胺時,，細胞生長不良而死亡,。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,，應置-20 ?C冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,，應重新加入原來量的谷氨酰胺?；A醫(yī)學細胞中心在其服務項目中配制分裝了高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）,。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中，其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基,。包裝為粉紅色,，-24?C保存。

　　Q3.細胞計數及存活測試
1,、原理：
(1)計算細胞數目可用血球計數盤或是Coultercounter粒子計數器自動計數,。
(2)血球計數盤一般有二個chambers，每個chamber中細刻9個1mm2大正方形,，其中4個角落之正方形再細刻16個小格,，深度均為0.1mm。當chamber上方蓋上蓋玻片后,，每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時，計數每個大正方形內之細胞數目,，乘以稀釋倍數,，再乘以104，即為每ml中之細胞數目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion，利用染料會滲入死細胞中而呈色,，而活細胞因細胞膜完整，染料無法滲入而不會呈色,。一般使用藍色之trypan blue染料，如果細胞不易吸收trypan blue,，則用紅色之Erythrosin bluish,。計算細胞活率：活細胞數/(活細胞數+死細胞數)×100%。計數應在臺盼蘭染色后數分鐘內完成,，隨時間延長,，部分活細胞也開始攝取染料;因為臺盼蘭對蛋白質有很強的親和力,，用不含血清的稀釋液，可以使染色計數更為準確,。