T3 ELISA
T3 ELISA樣品收集,、處理及保存方法:血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。檢測(cè)對(duì)象:人血清/血漿及相關(guān)液體實(shí)驗(yàn)方法:雙抗原夾心法進(jìn)行測(cè)
ELISA試劑分類(lèi): RD試劑盒,,GBD試劑盒,IBL試劑盒
2,、 血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3,、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4、 保存------如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
上海乾思生物科技代理**進(jìn)口試劑盒,經(jīng)銷(xiāo)眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的ELISA試劑盒,,生化試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體,,培養(yǎng)基,,血清,為中國(guó)科研試劑供應(yīng)商之一,,質(zhì)量被全國(guó)各大院??蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可,
并為Elisa試劑盒長(zhǎng)期供應(yīng)商.
常用生化試劑作用:
1,、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),,特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定,。一般工作濃度是50—100μg/ml,,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,,溶解細(xì)胞膜上的脂類(lèi)與蛋白質(zhì),,因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,并解離細(xì)胞中的核蛋白,,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀,。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等,。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,所以它和乳糖一樣,,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,,
使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類(lèi),。與乳糖不同的是,,
IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選,。作用*的誘導(dǎo)劑,,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定。
4,、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,,在IPTG的催化下顯藍(lán)色,。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5,、G418:一種抗生素,,對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑,。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方
6,、DMSO:二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑,,同時(shí)用作測(cè)試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物,。能溶于所有烷烴和烯烴。
7,、曲拉通X-100:TritonX-100,,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,,偏向于NP40,。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,,而對(duì)核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白,。
9,、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用,、PH緩沖作用,、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用,。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10,、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
注意事項(xiàng):
1,、去正規(guī)耗材經(jīng)銷(xiāo)處,。
2、注意耗材的防偽標(biāo)志?,F(xiàn)在各大廠商的耗材都增加了不同的防偽標(biāo)志,。如果貼有防偽標(biāo)準(zhǔn),注意是正好貼在封口處,,如果拆封了的話標(biāo)志也會(huì)碎了,。
一、常見(jiàn)elisa試劑盒
1,、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒:
如白介素,、選擇素、集落刺激因子,,腫瘤壞死因子,,干擾素,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子,,趨化因子,,細(xì)胞因子受體,粘附分子,,生長(zhǎng)因子,,凋亡因子等等
2,、肝纖維化檢測(cè)elisa試劑盒:
如纖維連接蛋白,透明質(zhì)酸,,膠原,,基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子,基質(zhì)金屬蛋白酶,,層粘蛋白等等
3,、心肌梗塞檢測(cè)elisa試劑盒:
如肌鈣蛋白,肌紅蛋白,,C-反應(yīng)蛋白等等
4,、內(nèi)分泌檢測(cè)elisa試劑盒:
如免疫球蛋白,抗鏈O-aso,類(lèi)風(fēng)濕因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等
二、食品安全檢驗(yàn)elisa試劑盒:
食品中的激素,、藥物,、霉菌毒素、過(guò)敏原殘留,、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒,,以及微生物、維生素等的檢測(cè)產(chǎn)品,。
三,、植物病毒、細(xì)菌,、真菌,、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒
四、動(dòng)植物疾病診斷類(lèi)如豬,、牛,、羊、馬等家畜和禽類(lèi)以及寵物類(lèi)檢測(cè)試劑盒