ATCC細(xì)胞培養(yǎng)之換液與消化傳代
ATCC即美國模式培養(yǎng)物集存庫（American type culture collection）的簡寫,。ATCC向發(fā)布其獲取、鑒定、保存及開發(fā)的生物標(biāo)準(zhǔn)品,，推動(dòng)科學(xué)研究的驗(yàn)證、應(yīng)用及進(jìn)步,。上海乾思生物專業(yè)經(jīng)營進(jìn)口ATCC細(xì)胞,，GIBCO血清，Abcam抗體,，GE試劑等等科研產(chǎn)品,，為你助力。
ATCC細(xì)胞有29,000多種不同品系,。以下為網(wǎng)上收集來的,，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技巧。
1,、細(xì)胞復(fù)蘇,，養(yǎng)細(xì)胞不要循規(guī)蹈矩，書上說的是經(jīng)典,，但有時(shí)也需要靈活運(yùn)用,。一般要求37℃復(fù)蘇細(xì)胞，但使用39℃,，融化了就馬上把細(xì)胞拿走,，細(xì)胞不會(huì)升溫到37℃以上，這樣復(fù)蘇的時(shí)間更短,，細(xì)胞受的傷害更小,，有利于提高細(xì)胞存活率。
2,、復(fù)蘇好的細(xì)胞是否要離心去除保護(hù)劑,，要看你的細(xì)胞是不是對保護(hù)劑敏感，一般是不離心的,，直接放到培養(yǎng)皿里,，加入新鮮培養(yǎng)液，待細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)液就行了,，其實(shí)對細(xì)胞的處理過程越簡單,，對細(xì)胞的損傷就越小。
3,、關(guān)于培養(yǎng)液中是否要加雙抗,。開始養(yǎng)細(xì)胞時(shí)是加的，后來發(fā)現(xiàn)基本沒有用,。該污染的還是污染,。而且雙抗對細(xì)胞有毒性，如果細(xì)胞很脆弱，要盡量減少對它的傷害,。
4,、關(guān)于污染。防止污染要從良好的無菌操作做起,。國內(nèi)一般使用酒精燈燎燒,，其實(shí)用酒精燈很危險(xiǎn)，而且未必能起到燒死細(xì)菌的作用,，如果燒的時(shí)間短,，物品表面跟本燒不熱，也燒不死細(xì)菌,，燒時(shí)間長了容易把物品燒壞,，而且容易燒到自己。在國外一般是不允許用酒精燈的,。所謂的基本無菌操作就是主要那幾條,，如不要在打開的容器上方運(yùn)動(dòng)，不要過早打開容器,，取物品要小心不要觸及其他等等,，還有一個(gè)zui重要的：手上要干凈，操作時(shí)可以經(jīng)常用酒精噴一下,，這點(diǎn)很關(guān)鍵,。
5、關(guān)于污染后的救治,。如果細(xì)胞不是很重要,，發(fā)現(xiàn)污染就及時(shí)扔掉！否則容易污染到培養(yǎng)箱里其他細(xì)胞,，甚至整個(gè)細(xì)胞房都會(huì)有污染源,。平時(shí)要養(yǎng)成及時(shí)凍存的習(xí)慣。對于細(xì)胞培養(yǎng)液中經(jīng)常出現(xiàn)的小黑點(diǎn),，數(shù)量少一般不會(huì)影響實(shí)驗(yàn),，如果數(shù)量很多,，可以使用環(huán)丙沙星或諾氟沙星等,，很便宜，加入一點(diǎn)點(diǎn)就可以了,，連續(xù)使用一個(gè)禮拜細(xì)胞會(huì)很干凈,。
6、關(guān)于換液,。如果細(xì)胞很脆弱,，可以采用一次只換一半培養(yǎng)液的方法，如果細(xì)胞分裂很旺盛，每次可以全換掉,。
7,、關(guān)于消化傳代。消化一定不要太過,，不然對細(xì)胞影響很大,。消化前使用PBS先洗一遍，可以縮短消化時(shí)間,，細(xì)胞很容易就能消化掉了,。
8、關(guān)于凍存,。用棉花包起來,，然后直接放到-20℃，半小時(shí)后轉(zhuǎn)-70℃,，過一夜轉(zhuǎn)液氮罐,。
ATCC細(xì)胞目錄：HO8910細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞,、Tca8113細(xì)胞,、OVCA433細(xì)胞,ACHN細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞,、NCI-H157細(xì)胞,、QBC939細(xì)胞、BIU87細(xì)胞,、HCT-8/vCR細(xì)胞,、Hut-102細(xì)胞、AAv-293細(xì)胞,、RKO-E6細(xì)胞,、FIP293細(xì)胞、HCC827細(xì)胞,、HBZY-1細(xì)胞,、NCI-H358細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞,、Acc-2細(xì)胞,、QG-56細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞,、K562/ADR細(xì)胞,、COC1細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞,、TE-11細(xì)胞,、CCC-HIE-2細(xì)胞,、CCC-HBE-2細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞,、293T細(xì)胞,、3T3-L1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞,、Bcap-37細(xì)胞,、Bel-7402細(xì)胞、Bel-7404細(xì)胞,、BGC-823細(xì)胞,、BHK-21細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞,、Caco-2細(xì)胞,、COLO-205細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞,、GLC-82細(xì)胞,、Hep G2細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞,、HSC-T6細(xì)胞,、HuH-7細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞,、NG108-15細(xì)胞,、P815細(xì)胞、PC-12細(xì)胞,、SF9細(xì)胞,、RGC-5細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞,、B16-F10細(xì)胞,、HO8910細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞,、16HBE細(xì)胞,、Bel-7405細(xì)胞、EA.hy926細(xì)胞,、Eca-109細(xì)胞,、HCT-8細(xì)胞、HK-2細(xì)胞,、KMB-17細(xì)胞,、MRC-5細(xì)胞,、WB-F344細(xì)胞,、QGY-7703細(xì)胞,、SRSV/3T3細(xì)胞、TF-1細(xì)胞,。
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