ATCC細胞培養(yǎng)之換液與消化傳代

ATCC即美國模式培養(yǎng)物集存庫（American type culture collection）的簡寫,。ATCC向發(fā)布其獲取、鑒定,、保存及開發(fā)的生物標準品,，推動科學研究的驗證,、應用及進步。上海乾思生物專業(yè)經營進口ATCC細胞,，GIBCO血清,，Abcam抗體，GE試劑等等科研產品,，為你助力,。

ATCC細胞有29,000多種不同品系。以下為網上收集來的,，細胞實驗技巧,。

1、細胞復蘇,，養(yǎng)細胞不要循規(guī)蹈矩,，書上說的是經典，但有時也需要靈活運用,。一般要求37℃復蘇細胞,，但使用39℃，融化了就馬上把細胞拿走,，細胞不會升溫到37℃以上,，這樣復蘇的時間更短，細胞受的傷害更小,，有利于提高細胞存活率,。

2、復蘇好的細胞是否要離心去除保護劑,，要看你的細胞是不是對保護劑敏感,，一般是不離心的，直接放到培養(yǎng)皿里,，加入新鮮培養(yǎng)液,，待細胞貼壁后換培養(yǎng)液就行了，其實對細胞的處理過程越簡單,，對細胞的損傷就越小,。

3、關于培養(yǎng)液中是否要加雙抗,。開始養(yǎng)細胞時是加的,，后來發(fā)現基本沒有用。該污染的還是污染,。而且雙抗對細胞有毒性,，如果細胞很脆弱，要盡量減少對它的傷害,。

4,、關于污染,。防止污染要從良好的無菌操作做起。國內一般使用酒精燈燎燒,，其實用酒精燈很危險,，而且未必能起到燒死細菌的作用，如果燒的時間短,，物品表面跟本燒不熱,，也燒不死細菌,，燒時間長了容易把物品燒壞,，而且容易燒到自己。在國外一般是不允許用酒精燈的,。所謂的基本無菌操作就是主要那幾條,，如不要在打開的容器上方運動，不要過早打開容器,，取物品要小心不要觸及其他等等,，還有一個zui重要的：手上要干凈，操作時可以經常用酒精噴一下,，這點很關鍵,。

5、關于污染后的救治,。如果細胞不是很重要,，發(fā)現污染就及時扔掉！否則容易污染到培養(yǎng)箱里其他細胞,，甚至整個細胞房都會有污染源,。平時要養(yǎng)成及時凍存的習慣。對于細胞培養(yǎng)液中經常出現的小黑點,，數量少一般不會影響實驗,，如果數量很多，可以使用環(huán)丙沙星或諾氟沙星等,，很便宜,，加入一點點就可以了，連續(xù)使用一個禮拜細胞會很干凈,。

6,、關于換液。如果細胞很脆弱,，可以采用一次只換一半培養(yǎng)液的方法,，如果細胞分裂很旺盛，每次可以全換掉,。

7,、關于消化傳代,。消化一定不要太過，不然對細胞影響很大,。消化前使用PBS先洗一遍,，可以縮短消化時間，細胞很容易就能消化掉了,。

8,、關于凍存。用棉花包起來,，然后直接放到-20℃,，半小時后轉-70℃，過一夜轉液氮罐,。

ATCC細胞目錄：HO8910細胞,、B16-F10細胞、Tca8113細胞,、OVCA433細胞,ACHN細胞,、Caov-3細胞、NCI-H157細胞,、QBC939細胞,、BIU87細胞、HCT-8/vCR細胞,、Hut-102細胞,、AAv-293細胞、RKO-E6細胞,、FIP293細胞,、HCC827細胞、HBZY-1細胞,、NCI-H358細胞,、HCCC-9810細胞、Acc-2細胞,、QG-56細胞,、HBL-100細胞、K562/ADR細胞,、COC1細胞,、LTEP-a-2細胞、TE-11細胞,、CCC-HIE-2細胞,、CCC-HBE-2細胞、ZR-75-30細胞、293T細胞,、3T3-L1細胞,、AsPC-1細胞、Bcap-37細胞,、Bel-7402細胞,、Bel-7404細胞、BGC-823細胞,、BHK-21細胞,、BxPC-3細胞、Caco-2細胞,、COLO-205細胞,、CTLL-2細胞、GLC-82細胞,、Hep G2細胞,、HIT-T15細胞,、HSC-T6細胞,、HuH-7細胞、MLTC-1細胞,、NG108-15細胞,、P815細胞、PC-12細胞,、SF9細胞,、RGC-5細胞、Tca8113細胞,、B16-F10細胞,、HO8910細胞、OVCA433細胞,、16HBE細胞,、Bel-7405細胞、EA.hy926細胞,、Eca-109細胞,、HCT-8細胞、HK-2細胞,、KMB-17細胞,、MRC-5細胞、WB-F344細胞,、QGY-7703細胞,、SRSV/3T3細胞、TF-1細胞,。

乾思生物整理編輯： 進口elisa試劑盒,，國產elisa試劑盒,，elisa試劑盒，試劑盒,，dna提取試劑盒,，免疫組化試劑盒，rna提取試劑盒,，質粒提取試劑盒,，dna試劑盒