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放射免疫(RIA)服務(wù)技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

時(shí)間:2015/5/15閱讀:284
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我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧,,承諾客戶不成功不收費(fèi),。我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信,,我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒,,客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
放射免疫分析(RIA)是以放射性核素作示蹤劑的標(biāo)記免疫分析方法,它具有的高度靈敏性,、特異性和性等特點(diǎn),特別適用于激素,、多肽等含量微少物質(zhì)的超微量分析,。如:腫瘤類(lèi);心血管,,腎病,,內(nèi)分泌類(lèi);多肽因子類(lèi),;腦-腸肽類(lèi),;胃腸病,,骨代謝類(lèi);甲狀腺功能類(lèi),;糖尿病類(lèi),;性腺類(lèi)等。
放免實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存:
1)血清(血漿)樣本:取全血加入促凝管(抗凝管),,2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,,收集上清,液氮或者-80℃冰箱保存,;
2)尿液樣本:樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,,液氮或者-80℃冰箱保存;胸腹水,、腦脊液,、肺泡灌洗液參照此實(shí)行;
3)細(xì)胞樣本:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),,樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,,液氮或者-80℃冰箱保存;檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS稀釋細(xì)胞懸液,,通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右,,收集上清同上;
4)組織樣本:切割標(biāo)本后,,稱取重量,,用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?br>當(dāng)抗原遇到相應(yīng)的抗體便形成抗原抗體復(fù)合物(Ag+Ab ?Ag -Ab),當(dāng)用放射性同位素標(biāo)記抗原再與相應(yīng)的抗體結(jié)合便形成標(biāo)記抗原和抗體復(fù)合物,。即: *Ag+Ab? *Ag-Ab,。
當(dāng)標(biāo)記抗原和未標(biāo)記抗原一起加入相應(yīng)的抗體時(shí)則兩種抗原產(chǎn)生相互的競(jìng)爭(zhēng),而生成有標(biāo)記抗原和抗體復(fù)合物以及非標(biāo)記抗原和抗體復(fù)合物,。
生成標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物與非標(biāo)記抗原的含量在一定的限度內(nèi)是呈反比的,,所以利用這個(gè)原理去測(cè)定未知抗原或抗體。
如果Ag多則*Ag-Ab(即結(jié)合抗原B)生成量減少,,*Ag(即游離抗原F)的剩余量就多,。相反,Ag少,,則*Ag-Ab生成量就多,,*Ag的剩余量就少。通過(guò)檢測(cè)游離抗原F和結(jié)合抗原B,,就可知未知抗原的存在與否以及含量的多少,。
RIA雖然有很多優(yōu)點(diǎn),,但也存在不少缺點(diǎn)。例如:①試劑的半衰期段,,費(fèi)用較高,,需要用閃爍計(jì)數(shù)儀等專(zhuān)門(mén)的設(shè)備;②放射性核素對(duì)人體存在著一定潛在的危害性,;③試驗(yàn)廢物處理困難,;④放射性核素標(biāo)記有時(shí)會(huì)改變某些生物物質(zhì)的生理活性。
注意事項(xiàng):
在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮?,將?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,,所以避免反復(fù)凍融。

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