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人血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒操作步驟

時間：2011/11/30閱讀：559

名稱:人血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒

人血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒僅供研究使用

目的:本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒ELISA試劑盒的含量,。

操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻,；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻,；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五、第六孔中,，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻,；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L,，1200ng/L,，600ng/L，300ng/L,， 150ng/L）,。

2.加樣:分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4.配液:將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5.洗滌:小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。

7.溫育:操作同3,。

8.洗滌:操作同5,。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11.測定:以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

人血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒操作步驟

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