人Elisa試劑盒檢測原理

時間：2011/11/25閱讀：588

人Elisa試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3,。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體,，這些抗體就會與HEV的多肽抗原結(jié)合,，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份,。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物,，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,，加入TMB底物溶液,，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),，并在波長:450nm處測量O.D.值,按照人Elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn),O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性.

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