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上海乾思生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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人Elisa試劑盒檢測(cè)原理

時(shí)間：2011/11/25閱讀：615
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    人Elisa試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù),，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,，這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3,。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合,，并固定在上面,，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物,，經(jīng)第二次孵育后,，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,，加入TMB底物溶液,，在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),，只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),，并在波長(zhǎng):450nm處測(cè)量O.D.值,按照人Elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性.
 

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