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牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基配制步驟

時間：2011/11/8閱讀：1540

牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基這是一種應(yīng)用十分廣泛的天然培養(yǎng)基,，其中的牛肉膏為微生物提供碳源,、磷酸鹽和維生素,，蛋白胨主要提供氮源和維生素,，而NaCl提供無機鹽。

配制具體步驟:

1.稱量:按培養(yǎng)基配方比例依次準確地稱取牛肉膏,、蛋白胨,、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,，放在小燒杯或表面皿中稱量,，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上,，稱量后直接放入水中,，這時如稍微加熱，牛肉膏便會與稱量紙分離,，然后立即取出紙片,。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要迅速,。另外,，稱藥品時嚴防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品,，或稱取一種藥品后,，洗凈、擦干,，再稱取另一藥品,，瓶蓋也不要蓋錯,。

2.溶化:在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量,，用玻棒攪勻，然后,，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解,。待藥品*溶解后,，補充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基,，將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中,，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中,，需不斷攪拌,，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。zui后補足所失的水分,。

3.調(diào)pH:在未調(diào)pH前,，先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH值，如果pH偏酸,，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/L NaOH,，邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH值,，直至pH達7．6,。反之，則用1mol/L HCl進行調(diào)節(jié),。注意pH值不要調(diào)過頭,，以避免回調(diào)，否則,，將會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度,。　　對于有些要求pH值較的微生物，其pH的調(diào)節(jié)可用酸度計進行（使用方法,，可參考有關(guān)說明書）,。

4.過濾:趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀察,。一般無特殊要求的情況下,，這一步可以省去（本實驗無需過濾）。

5.分裝:按實驗要求,，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi),。

6.加塞:培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞,，以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染,，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本實驗后面）。

7.包扎:加塞后,，將全部試管用麻繩捆扎好,，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好,。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱,、組別、日期,。三角燒瓶加塞后,，外包牛皮紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好,，使用時容易解開,，同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別,、日期,。

牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基配制步驟

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