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用于檢測抗體的ELISA

時間：2011/10/13閱讀：865
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乾思 生物編輯整理：
間接ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒） 本法主要用于檢測抗體。以鴨病毒性肝炎（DVH）抗體的ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒）為例,，間接ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒）的操作程序如下,。
　?。?） 材料
　?、?包被液、洗滌液,、保溫液,、底物液、終止液,；
　?、?DVH包被抗原、酶標抗抗體,、陰性及陽性DVH參考血清,；待檢鴨血清；
　?、?ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒）檢測儀,、加樣器、聚苯乙烯微量板,。
　?。?） 方法步驟
　　① 加抗原包被 → 4℃過夜,，洗滌三次、拋干
　?、?加待檢血清 → 37℃ 2小時,，洗滌三次、拋干
　?、?加酶標抗體 → 37℃ 2小時,，洗滌三次、拋干
　?、?加底物液 → 37℃ 30分鐘,，加終止液
　　⑤ 用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒）檢測儀測定OD值,，并計算出P/N比值,。
　　（3） 結(jié)果判定已知陽性血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1,，而且已知陽性血清的OD值≥0.4,；在上述條件成立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待檢血清的OD值≥0.4,，則判為陽性,，否則判為陰性。

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