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大鼠TNF-α ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及操作事項(xiàng)

時(shí)間:2011/10/13閱讀:2141
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大鼠TNF-α  ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中TNF-α含量,。實(shí)驗(yàn)原理大鼠TNF-α  ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠TNF-α水平,。用純化的大鼠TNF-α抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入TNF-α,,再與HRP標(biāo)記的TNF-α抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的TNF-α呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠TNF-α濃度,。大鼠TNF-α  ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。6.底物請避光保存,。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 9.本試劑不同批號組分不得混用,。10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn)。

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