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小心,!毛細(xì)管色譜柱老化不能繼續(xù)了
毛細(xì)管色譜柱是色譜儀器的核心部件,,說它是一個(gè)儀器的“心臟”絕不為過。色譜柱在整個(gè)檢測過程中起著樣品分離的作用,,選用的是否合適決定這整個(gè)實(shí)驗(yàn)的成敗,,因此,每個(gè)使用色譜的人員都應(yīng)該深入地地掌握毛細(xì)管色譜柱的基本知識(shí),。
毛細(xì)管色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,,就可以對(duì)色譜柱進(jìn)行老化,對(duì)色譜柱加熱至恒定溫度,,通常取其使用溫度上限,,超過色譜柱的溫度上限極易損壞色譜柱。當(dāng)達(dá)到老化溫度后,,記錄并觀察基線,初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,,在達(dá)到老化溫度后5-10min開始下降,,并且會(huì)持續(xù)30-90分鐘。當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后,,就會(huì)穩(wěn)定下來,。如果在2-3個(gè)小時(shí)后基線仍無法穩(wěn)定,或者在15-20分鐘后仍無明顯的下降趨勢,,那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染,。遇到這樣的情況,應(yīng)該立即將柱溫降到40度以下,,盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題,。如果繼續(xù)老化,不僅對(duì)色譜柱有損壞,,而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線,。
一般來講,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長,,貳弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需老化時(shí)間較短,。而PLOT色譜柱的老化方法又各不相同。需按照毛細(xì)管色譜柱供應(yīng)商提供的老化條件進(jìn)行老化,。在色譜柱老化過程結(jié)束后,,采用程序升溫做一次空白試驗(yàn),一般是從40℃/min從50℃升到高使用溫度,,達(dá)到高使用溫度后保持10min,,這樣我們會(huì)得到一張流失圖,,這些數(shù)值可以后作對(duì)比試驗(yàn),并且對(duì)實(shí)驗(yàn)問題的解決有幫助,。
在空白試驗(yàn)的色譜圖中,,不應(yīng)該有色譜峰出現(xiàn),如果出現(xiàn)了色譜峰,,通??赡苁皬倪M(jìn)樣口帶來的污染物,如果在正常使用狀態(tài)下,,色譜柱性能開始下降,,基線的信號(hào)值會(huì)增高,另外,,如果在較低的溫度下,,色譜柱的保存用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住,并放回原包裝,,再次安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分,,保證沒有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小?/div>
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