毛細管色譜柱是色譜儀器的核心部件,,說它是一個儀器的“心臟”絕不為過。色譜柱在整個檢測過程中起著樣品分離的作用,,選用的是否合適決定這整個實驗的成敗,,因此,每個使用色譜的人員都應該深入地地掌握毛細管色譜柱的基本知識,。
毛細管色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,,就可以對色譜柱進行老化,對色譜柱加熱至恒定溫度,,通常取其使用溫度上限,,超過色譜柱的溫度上限極易損壞色譜柱。當達到老化溫度后,,記錄并觀察基線,,初始階段基線應持續(xù)上升,在達到老化溫度后5-10min開始下降,,并且會持續(xù)30-90分鐘,。當達到一個固定的值后,就會穩(wěn)定下來。如果在2-3個小時后基線仍無法穩(wěn)定,,或者在15-20分鐘后仍無明顯的下降趨勢,,那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,,應該立即將柱溫降到40度以下,,盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關的問題。如果繼續(xù)老化,,不僅對色譜柱有損壞,,而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。
一般來講,,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時間較長,,貳弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需老化時間較短。而PLOT色譜柱的老化方法又各不相同,。需按照毛細管色譜柱供應商提供的老化條件進行老化,。在色譜柱老化過程結束后,采用程序升溫做一次空白試驗,,一般是從40℃/min從50℃升到高使用溫度,,達到高使用溫度后保持10min,這樣我們會得到一張流失圖,,這些數(shù)值可以后作對比試驗,,并且對實驗問題的解決有幫助。
在空白試驗的色譜圖中,,不應該有色譜峰出現(xiàn),,如果出現(xiàn)了色譜峰,通??赡苁皬倪M樣口帶來的污染物,,如果在正常使用狀態(tài)下,色譜柱性能開始下降,,基線的信號值會增高,,另外,如果在較低的溫度下,,色譜柱的保存用進樣墊將色譜柱的兩端封住,,并放回原包裝,再次安裝時要將色譜柱的兩端截去一部分,,保證沒有進樣墊的碎屑殘留于柱中,。