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分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,。
而分光光度法則是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,。 常用的波長(zhǎng)范圍為:(1)200~400nm的紫外光區(qū),(2)400~760nm的可見(jiàn)光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū),。所用儀器為紫外分光光度計(jì),、可見(jiàn)光分光光度計(jì)(或比色計(jì)),、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度,,所有儀器應(yīng)按照國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,,定期進(jìn)行校正檢定。 單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí),,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長(zhǎng)度)成正比,,其關(guān)系如下式:
A=-log(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸收度,;
為入射的單色光強(qiáng)度,;
為透射的單色光強(qiáng)度;
T 為物質(zhì)的透射比,;
k 為吸收系數(shù),;
L 為被分析物質(zhì)的光程
c 為物質(zhì)的濃度
分光光度計(jì)的簡(jiǎn)單原理
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,,光源透過(guò)測(cè)試的樣品后,,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
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