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氨基酸分析儀檢測透明膠質(zhì)類中的游離氨基酸
摘要
本品為Tau,、Glu,、Gly、Val,、Cysteine等5種氨基酸配制而成的透明膠質(zhì)類物質(zhì),，使用Biochrom30+全自動氨基酸分析儀，對其所含的游離氨基酸組分及含量進行分析,，并了解對該樣品高溫滅菌前后,，所含氨基酸的具體影響,。結(jié)果表明該未知樣中氨基酸各單個氨基酸含量的濃度，及高溫滅菌前后的分別見附頁結(jié)果表,。
大昌華嘉是一家專注于亞洲地區(qū),，在市場拓展服務(wù)領(lǐng)域處于領(lǐng)先地位的集團。大昌華嘉致力于幫助其他公司和品牌拓展在消費品,、醫(yī)藥保健,、特色原料、科技事業(yè)領(lǐng)域的業(yè)務(wù),。大昌華嘉的服務(wù)范圍包括采購,、市場研究與分析、市場營銷與銷售,、配送與物流以及售后服務(wù),。公司在瑞士證券交易所上市，在全球35個市場營運,，擁有33,000名專業(yè)員工,， 2018年銷售凈額為113億瑞士法郎。大昌華嘉于1865年成立,，憑借深厚的瑞士傳統(tǒng)背景,，公司在亞洲開展業(yè)務(wù)歷史悠久， 深深植根于亞太地區(qū)的社會和企業(yè)界,。大昌華嘉科技事業(yè)部專注于為特定的行業(yè)應(yīng)用領(lǐng)域提供全面的解決方案,。2018年該業(yè)務(wù)單元擁有1,220名員工，凈銷售額為4.121億瑞士法郎,。
大昌華嘉(大昌洋行（上海）有限公司)是一家專注于亞洲地區(qū),，在市場拓展服務(wù)領(lǐng)域處于領(lǐng)先地位的集團。大昌華嘉致力于幫助其他公司和品牌拓展在消費品,、醫(yī)藥保健,、特色原料、科技事業(yè)領(lǐng)域的業(yè)務(wù),。大昌華嘉于1865年成立,，憑借深厚的瑞士傳統(tǒng)背景，公司在亞洲開展業(yè)務(wù)歷史悠久,，深深植根于亞太地區(qū)的社會和企業(yè)界,。
大昌華嘉儀器部專業(yè)提供分析儀器及設(shè)備，代理眾多歐美先進儀器,，產(chǎn)品范圍包括：顆粒,，物理，化學(xué),，生化,，通用實驗室的各類分析儀器以及流程儀表設(shè)備,，在中國的石化，化工,，制藥,，食品，飲料,，農(nóng)業(yè)科技等諸多領(lǐng)域擁有大量用戶,，具有良好的市場聲譽。我們的業(yè)務(wù)逐年增加,，市場不斷擴大,。大昌華嘉公司在中國設(shè)有多個銷售，服務(wù)網(wǎng)點,，旨在為客戶提供全方位的產(chǎn)品和服務(wù),。
一、樣品前處理
1,、所用試劑
1.1 Loading Buffer：鋰鹽系統(tǒng),，pH 2.2
1.2 磺基水楊酸溶液：取50g磺基水楊酸溶于1L純水中
1.3 乙二胺四乙酸二鈉溶液：取10g EDTA-Na溶于1L純水中
1.4 0.06mol/L 鹽酸：取50mL 鹽酸加水稀釋至10mL,混勻
1.5 5種氨基酸標準品、Cystine單標
2,、前處理設(shè)備
1) 分析天平:精度為 0.0001g
2) 移液槍及槍頭
3) 0.22um濾膜
4) 一次性注射器
5) 低范圍pH試紙
3、樣品制備（參考NY/T 1975-2010）
因樣品為透明膠質(zhì)類物質(zhì),，且可能含有未知大分子等雜質(zhì),，故需(參考NY/T 1975)進行除蛋白前處理：
吸取2 mL樣品于10 mL離心管或試管中,準確加人2 mL磺基水楊酸溶液(1.2)，混勻,放置1h,。準確加入1 mL EDTA-Na溶液(1.3)和1 mL鹽酸溶液(1.4),混勻,離心15 min(或用0.45um的微孔濾膜過濾),。吸取上清液(或濾液)1 mL(測定當(dāng)前pH，若有需要則可加少許的Loading Buffer (1.1),使氨基酸濃度處于儀器檢測范圍內(nèi)),，移液槍取上述溶液1mL至一次性注射劑,，過濾膜，上機待測,。
二,、分析方法描述（Biochrom 30+）
氨基酸分析儀分析方法參數(shù)：
1) 色譜柱：Biochrom Li型陽離子交換樹脂柱，4.6*20cm
2) 分離程序：
3) 運行時間：經(jīng)分析時間+再生時間 168.15min
4) 反應(yīng)單元溫度：135°C,。
5) 檢測波長：570nm,、440nm同時檢測。
三,、樣品中氨基酸含量的計算
樣品測定液氨基酸的含量按式(1)計算:
Ci = Cs/As × Ai× F ················· (1)式中:
Ci ———樣品測定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Cs ———氨基酸標準工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Ai ———試樣測定液氨基酸i的峰面積;
As ———氨基酸標準工作液氨基酸s的峰面積;
F ———樣品稀釋倍數(shù),。
附：透明膠質(zhì)類物質(zhì)中，高溫滅菌前后比較的游離氨基酸,，分析圖譜及做樣結(jié)果：
由結(jié)果可知：高溫滅菌之后的游離氨基酸含量,，相較于滅菌前會有少許提升,。這是由于滅菌前的樣品中可能含有的少許干擾物質(zhì)或雜菌，存在經(jīng)過高溫滅菌等的處理會被破壞,，釋放少許的氨基酸的可能,，屬合理正常現(xiàn)象,。
圖1. 樣品A--滅菌前—Tau,、Glu、Gly,、Val+Cystine
圖2. 樣品B--滅菌后—Tau,、Glu、Gly,、Val+Cystine
