液相色譜使用要求有哪些?
1.流動相必須用HPLC級的試劑,,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細的膜過濾),。
2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,,脫氣后應該恢復到室溫后使用,。
3.不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液,。
4.使用緩沖溶液時,,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,,以充分洗去離子,。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上,。
5.長時間不用儀器,,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,,而應該用有機相(如,,甲醇等),因為,純水易長霉,。
6.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器,。
7.C18柱不能進蛋白樣品,血樣,、生物樣品,。
8.堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,,清洗方法:
①以異丙醇作溶劑沖洗,;
②放在異丙醇中間用超聲波清洗;
③用10%稀硝酸清洗,;
9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),,重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡,。
10.如果進液管內(nèi)不進液體時,,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范圍,,不得注射強酸強堿的樣品,,特別是堿性樣品。
12.更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,,然后插入新的流動相中,。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。