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了解熒光分光光度計,，從了解它的工作原理開始
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜,、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產率,、熒光壽命,、熒光偏振等許多物理參數，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況,。通過對這些參數的測定,，不但可以做一般的定量分析，而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,，從而闡明分子結構與功能之間的關系,。
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質發(fā)出熒光,，熒光經過濾過和反射后,，被光電倍增管所接受，然后以圖或數字的形式顯示出來,。
物質熒光的產生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,，從而產生熒光.
不同物質由于分子結構的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現為各種物質都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,；,，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。
在溶液中,，當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即IF=KC,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,，熒光分析通常也采用標準曲線法進行。
優(yōu)點在于它能夠分析如蛋白質或酶等微量的樣品,，不會破壞其物理化學性質,。配合微量比色皿，可提高低強度熒光樣品的準確性,。在短短幾分鐘或幾小時內,，我們的熒光分光光度計可以幫助您理解復雜的生物過程。