移液槍是實驗操作上的常用工具,對于頂尖高手而言,,重要的就是實驗的誤差最小,,重復再現性好,那就要注意正確移液槍使用,。
1. 影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,,手溫較高,使得空氣膨脹,,吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差
(2)氣密性:tip和槍體的結合部,,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差
(3)吸速:容易造成tip內氣泡產生,,而且會污染槍頭
(4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時,,蒸汽進入槍頭,內壓增高,,結果在壓出液體時,,壓力變大,而產生誤差,。解決辦法:反復抽吸4-5次就可改善,。
2. 移液器具體使用方法
更換tip法:
(1)調節(jié)旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,,再回旋至刻度,。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差,。
(2)插上tip:無菌操作時,,要注意動作迅速正確,不能用手碰tip,,動作的力度要保持一致,,禁止廢動作,。普通操作時,,可用拇指食指上緊,但手不能碰tip頭處,。
(3)指壓到第一段,,tip頭接觸試劑。白色tip進到液面1 mm一下,,黃色tip 2-3 mm,,藍色tip2-4 mm,避免液壓的影響造成的誤差,。
(4)緩慢吸試劑,,禁止速度過快,,液體進入槍頭。
(5)移出tip后,,先在容器內壁輕輕靠住,,使tip外壁液體流下。
(6)將tip貼在目標容器內壁,,輕輕按到第一段,,壓出液體。
(7)tip 頭在容器內壁略上滑動,,保留頂部少量液體,,移出目標容器,手指卸掉 tip,,注意不要使試劑濺出,。
一只tip分注法:不適用于揮發(fā)性,有毒性試劑,。
(1)同上述(1)-(4),,移出液面后,先緩慢按到第一段,,在用力按到第二段,,將試劑全壓出。
(2)同上述(3),,緩慢吸出液體,。
(3)在目標容器液體上空,壓出試劑到第二段,,注意壓的力度要和A相同,,還應注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段,,可重復上述操作,。達到目標容器原有液體不污染tip的目的。
轉移數ul的貴重試劑時的方法:
(1)同上述(1)-(4),,移出液面后,,在容器內壁輕按幾下,使外壁液體流下,。白色tip進到液面1 mm以下,,這最重要。
(2)tip頭浸入目標容器的液面下,,緩慢壓到第一段,。
(3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,,反復4-5次,,,洗凈tip內壁液體,。
(4)將tip 頭移出液面,,在內壁輕輕靠住,壓出液體到第二段,。
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