一,、實(shí)驗(yàn)原理
脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸結(jié)合成的脂類化合物,能溶于脂溶性有機(jī)溶劑,。
本實(shí)驗(yàn)用重量法,,利用脂肪能溶于脂溶性溶劑的這一特征,用脂溶性溶劑將脂肪提取出來,,借蒸發(fā)除去溶劑后的稱量,。整個(gè)提取過程均在索氏提取器中進(jìn)行。通常使用的脂溶性溶劑為Diethyl Ether或沸為30~60℃的石油醚,。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除脂肪外,,還含有游離脂肪酸、磷脂,、固醇,、芳香油及某些色素等,,故稱為“粗脂肪"。
二,、實(shí)驗(yàn)用品
(一)器材
(1)水浴鍋,。
(2)烘箱。
(3)索氏提取器一套,,研缽一個(gè),。
(4)脫脂濾紙及脫脂棉花。
(5)分析天平,。
(二)試劑
無水Diethyl Ether(AR)
(三)材料
樣品(芝麻,、花生、大豆或玉米),。
三,、實(shí)驗(yàn)程序
(一)操作方法
1.裝置索氏脂肪提取器
2.樣品的制備
將樣品置80~100℃真空烘箱烘至恒重,放冷后研成粉末,,稱取樣品3.00g,,放入干燥濾紙筒內(nèi),以脫脂棉花蓋之,。
3. 提取
將盛有樣品的濾紙筒放入索氏提取器內(nèi),,注意勿使筒內(nèi)樣品高出提取器的虹吸管加入Diethyl Ether約占提取管容積1/3,以浸濕樣品,,同時(shí)向已知重量的提取瓶內(nèi)加入約占其容積1/3的Diethyl Ether,。將儀器各部連接如下圖,夾穩(wěn),,并置于恒溫水浴鍋上,,使提取瓶底部浸入水中,開啟自來水,,使水從冷凝器下孔流入,,上孔流出,然后開啟水浴鍋開關(guān),,加熱水浴,。當(dāng)溫度上升至Diethyl Ether沸點(diǎn)時(shí),Diethyl Ether開始沸騰,,并形成蒸汽由連接管上升至冷凝器,,蒸氣遇冷而成液體,滴入提取管內(nèi)將樣品浸泡,,樣品的脂肪將逐漸溶于其中,,當(dāng)液面超過虹吸管上端時(shí),溶有脂肪的Diethyl Ether經(jīng)虹吸管流入提取瓶。調(diào)節(jié)水浴溫度至50~60℃,,使Diethyl Ether每小時(shí)循環(huán)3~5次,,提取時(shí)間視樣品性質(zhì)而定,通常要12~16h,。
4.干燥及稱重
提取完畢后,,卸下的提取瓶,在水浴上蒸餾回收Diethyl Ether(避免著火),。清洗提取瓶外壁,zui后把提取瓶置104℃恒溫烘箱中烘至恒重,。
5.結(jié)果處理
粗脂肪(%)=(m2-m1)×100/m
式中:m——風(fēng)干試樣重量,,
ml——已恒重的抽提瓶重量,
m2——已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量,,
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