日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

引   言

生牛乳中富含多種天然活性蛋白,，如 α-乳白蛋白 (α-Lactalbumin),、β-乳球蛋白 (β-Lactoglobulin)、乳鐵蛋白(Lactoferrin, LF),、免疫球蛋白 G (Immunoglobulin G, IgG) 和乳過(guò)氧化物酶 (Lactoperoxidase, LP) 等,，這些天然活性蛋白在抵抗細(xì)菌、病毒入侵,，增強(qiáng)免疫力,，促進(jìn)組織修復(fù)和生長(zhǎng)發(fā)育等方面發(fā)揮著重要作用,。其中乳鐵蛋白能夠參與機(jī)體鐵代謝，促進(jìn)體內(nèi)鐵元素的吸收和運(yùn)輸,，具有抗菌,、抗炎、抗氧化,、抗腫瘤和增強(qiáng)免疫力的功能,。不同的熱處理方式（巴氏殺菌、超高溫 (UHT) 滅菌,、蒸發(fā)濃縮及噴霧干燥等）,，會(huì)導(dǎo)致乳制品中乳鐵蛋白出現(xiàn)不同程度的變性失活，從而影響其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及市場(chǎng)售價(jià),。 

賽默飛新國(guó)標(biāo)應(yīng)對(duì)方案亮點(diǎn)

1. 本試驗(yàn)參考 GB 5009.299-2024,、NY/T 4439-2023 以及相關(guān)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)巴氏殺菌乳,、超高溫滅菌乳和嬰幼兒配方奶粉中乳鐵蛋白的含量進(jìn)行測(cè)定,。

2. 為獲得良好的峰形和分離度，試驗(yàn)對(duì)樣品前處理和液相色譜條件進(jìn)行了適當(dāng)優(yōu)化,，在柱溫 30 ℃,、流速 1.0 mL/min 條件下，以 0.1% 三氟乙酸水-0.1% 三氟乙酸乙腈 作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,，系統(tǒng)最大壓力值不超過(guò) 106 bar,。

3. 試驗(yàn)結(jié)果表明：乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液 (50.0 μg/mL) 色譜峰不對(duì)稱因子 1.00，峰形良好,，理論塔板數(shù) 30549,，柱效優(yōu)異；連續(xù)三次進(jìn)樣,，保留時(shí)間和峰面積的 RSD 均小于 1%,，方法重現(xiàn)性好；線性低點(diǎn) (1.00 μg/mL) 信噪比為 8.2,，方法靈敏度較高,；線性范圍 1.00-200 μg/mL，線性相關(guān)系數(shù) r2≥0.9998,，線性良好,。

4. 在反相液相色譜法測(cè)定乳制品中乳鐵蛋白含量的試驗(yàn)中，BioBasic 4 色譜柱（孔徑 300 Å）配合 Vanquish Core 高效液相色譜系統(tǒng),，表現(xiàn)出了良好的重現(xiàn)性和優(yōu)異的穩(wěn)定性,，方法檢出限和定量限均滿足標(biāo)準(zhǔn)要求，可供乳制品企業(yè)及食品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室參考,。

向下滑動(dòng)查看所有內(nèi)容

GB 5009.299-2024

 賽默飛完整應(yīng)用解決方案

01

樣品前處理

1.1 試樣提取

1.1.1 液體試樣：低溫奶（生牛乳,、巴氏殺菌乳）/ 常溫奶（超高溫 (UHT) 滅菌乳）

稱取試樣 5 g（精確到 0.1 mg）于 50 mL 帶刻度旋蓋離心管中,，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ定容至 25.0 mL，渦旋振蕩提取 3 min,，12000 rpm 4 ℃ 離心 15 min,。室溫靜置，去除上層浮脂,，取上清液待凈化,。

1.1.2 固體試樣：乳粉（嬰幼兒配方奶粉）

稱取試樣 2 g（精確到 0.1 mg）于 50 mL 帶刻度旋蓋離心管中，加適量磷酸鹽緩沖液Ⅱ溫?zé)嵴駬u溶解,，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ定容至 50.0 mL,，渦旋震蕩提取 3 min ，靜置 30 min 以上,，12000 rpm 4 ℃ 離心 15 min,。室溫靜置，去除上層浮脂,，取上清液待凈化,。

向下滑動(dòng)查看所有內(nèi)容

1.2 試樣凈化

1.2.1 活化：HyperSep 肝素親和柱 (P/N: 60105-110-B) 下端 Luer 接頭連接至固相萃取裝置,，上端通過(guò)適配器 (P/N: 60104-259) 串聯(lián) 10 mL 注射器空筒,， 加入 2×5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ活化肝素親和，控制滴速 2d/3s,；

1.2.2 上樣：待活化步驟液面接近小柱篩板時(shí),，準(zhǔn)確移取 10.0 mL 上述樣液至注射器空筒 (P/N: S7510-10) 中，控制滴速 2d/3s,，棄去流出液,；

1.2.3 淋洗：待上樣步驟液面接近小柱篩板時(shí)，加入 2×5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ淋洗小柱,，棄去流出液,，移除適配器和注射器空筒，負(fù)壓抽干小柱 2 min,；

1.2.4 洗脫：加入 2×2.5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅰ洗脫,，收集全部洗脫液，并用磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至 5.00 mL,，過(guò) 0.2 μm 親水性 PTFE 針式過(guò)濾器 (P/N: 42213-NPL) ,，濾液待上機(jī)測(cè)試。

向下滑動(dòng)查看所有內(nèi)容

02

儀器配置及色譜條件

Thermo Scientific™ Vanquish Core™ 高效液相色譜系統(tǒng),，配置：泵 Quaternary Pump C (VC-P20-A),，自動(dòng)進(jìn)樣器 Split Sampler CT (VC-A12-A)，柱溫箱 Column Compartment C (VC-C10-A),，檢測(cè)器 Diode Array Detector CG (VC-D11-A),，數(shù)據(jù)處理 Chromeleon™ 7.3

色譜柱：BioBasic 4, 5 μm, 4.6×250 mm (P/N: 72305-254630)

流動(dòng)相：A: 0.1% 三氟乙酸水 B: 0.1% 三氟乙酸乙腈

流速：1.0 mL/min

梯度洗脫程序：

進(jìn)樣量：50 µL

柱溫：30 ℃

檢測(cè)器：DAD, 采集波長(zhǎng): 280 nm,；采集頻率: 5 Hz；光譜采集: 190-400 nm

向下滑動(dòng)查看所有內(nèi)容

03

譜圖及數(shù)據(jù)

3.1 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液的分離譜圖及數(shù)據(jù)

圖 1 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液的分離譜圖及數(shù)據(jù) (50.0 μg/mL)（點(diǎn)擊查看大圖）

如圖 1 所示,，乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液 (50.0 μg/mL) 保留時(shí)間為 12.137 min,，色譜峰形良好，不對(duì)稱因子 1.00,，柱效優(yōu)異,，理論塔板數(shù) 30549。乳鐵蛋白在 280 nm 處有特征吸收峰,。

3.2 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液連續(xù)進(jìn)樣疊加譜圖

圖 2 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液連續(xù)進(jìn)樣疊加譜圖 (50.0 μg/mL, n=3)（點(diǎn)擊查看大圖）

乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液 (50.0 μg/mL) 連續(xù)三次進(jìn)樣,，保留時(shí)間和峰面積的 RSD 均小于 1%，方法重現(xiàn)性好,，分離譜圖及數(shù)據(jù)詳見(jiàn)圖 2,。

3.3 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液校準(zhǔn)曲線疊加譜圖

圖 3 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液校準(zhǔn)曲線疊加譜圖 (1.00/5.00/10.0/50.0/100/200 μg/mL)（點(diǎn)擊查看大圖）

如圖 3 所示，乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液線性范圍 1.00-200 μg/mL,，線性相關(guān)系數(shù) r2≥0.9998,，線性良好。

3.4 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液線性最低點(diǎn)與空白溶液疊加譜圖

圖 4 乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品溶液線性最低點(diǎn) (1.00 μg/mL) 與空白溶液疊加譜圖（點(diǎn)擊查看大圖）

當(dāng)進(jìn)樣體積為 50 uL 時(shí),，以乳鐵蛋白 (1.00 μg/mL) 的峰高為 S,，選取 10.5-11.5 min 基質(zhì)噪音的平均值為 N，線性低點(diǎn)信噪比 S/N=8.2,，如圖 4 所示,，乳鐵蛋白測(cè)定方法靈敏度相對(duì)較高。

3.5 在 0.1% 三氟乙酸水-乙腈流動(dòng)相體系下,，乳鐵蛋白的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰形及響應(yīng)

圖 5 在 0.1% 三氟乙酸水-乙腈流動(dòng)相體系下,，乳鐵蛋白的標(biāo)準(zhǔn)品溶液疊加譜圖（點(diǎn)擊查看大圖）

如圖 5 所示，當(dāng)流動(dòng)相 B 為純乙腈時(shí),，乳鐵蛋白峰形會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾,，導(dǎo)致線性最低點(diǎn) (1.00 μg/mL) 響應(yīng)較差，無(wú)法自動(dòng)積分,，方法檢出限不能滿足標(biāo)準(zhǔn)要求,。綜合乳鐵蛋白行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) NY/T 4439-2023 和團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn) T/TDSTIA 006-2019 推薦的色譜條件，本試驗(yàn)最終選擇 0.1% 三氟乙酸水-0.1% 三氟乙酸乙腈 作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,，且系統(tǒng)最大壓力值不超過(guò) 106 bar,。

3.6 巴氏殺菌乳（低溫奶）、超高溫滅菌乳（常溫奶）及嬰幼兒配方奶粉樣品溶液分離譜圖

圖 6 巴氏殺菌乳（低溫奶）樣品溶液分離譜圖

（點(diǎn)擊查看大圖）

圖 7 超高溫滅菌乳（常溫奶）樣品溶液分離譜圖

（點(diǎn)擊查看大圖）

圖 8 嬰幼兒配方奶粉樣品溶液分離譜圖及數(shù)據(jù)

（點(diǎn)擊查看大圖）

滑動(dòng)查看更多

乳鐵蛋白對(duì)溫度非常敏感‌,，高溫會(huì)破壞其化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物活性,，使得肝素親和柱無(wú)法有效富集。如圖 6-8 所示,，巴氏殺菌乳（低溫奶）中乳鐵蛋白含量為 13.4 mg/kg,；而超高溫滅菌乳（常溫奶）和嬰幼兒配方奶粉中乳鐵蛋白均為未檢出,。

04

GB 5009.299-2024 相關(guān)色譜耗材推薦

分析柱及保護(hù)柱

BioBasic 4, 5 μm, 4.6×250 mm

(P/N: 72305-254630)

BioBasic 保護(hù)柱柱芯, 5 μm, 4.0×10 mm, 4 pk

(P/N: 72305-014001)

Uniguard 直連式保護(hù)柱柱套

(P/N: 850-00)

樣品前處理

HyperSep 肝素親和柱，3 mg, 10/pk

(P/N: 60105-110-B)

HyperSep 玻璃室真空固相萃取裝置,，16 位

(P/N: 60104-232)

適配器,，適用于 1 mL、3 mL,、6 mL SPE 小柱轉(zhuǎn)接,，15/pk

(P/N: 60104-259)

National Target 全塑料一次性注射器，Luer-Slip, 10 mL, 100/pk

(P/N: S7510-10)

Titan 3 親水性 PTFE 針式過(guò)濾器,，17 mm, 0.2 μm, 200/pk

(P/N: 42213-NPL)

向下滑動(dòng)查看所有內(nèi)容

05

參考文獻(xiàn)

[1] GB 5009.299-2024 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乳鐵蛋白的測(cè)定

[2] NY/T 4439-2023 奶及奶制品中乳鐵蛋白的測(cè)定 高效液相色譜法

[3] T/TDSTIA 006-2019 奶及奶制品中乳鐵蛋白的測(cè)定 液相色譜法

[4] T/CCAA 70-2023 牛乳基嬰兒配方奶粉中乳鐵蛋白含量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

想要了解更多應(yīng)用詳情,，請(qǐng)掃描二維碼下載

如需合作轉(zhuǎn)載本文，請(qǐng)文末留言,。