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維生素AD滴劑中微量VD3

閱讀:581      發(fā)布時間:2022-10-19
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2010版《中國藥典》中關于維生素D的測定方法非常復雜,要求測定前維生素D和維生素D3的含量,,常用第二法測定,,方法中樣品需要皂化、液液萃取,、濃縮,、反相制備色譜凈化、再濃縮等一系列處理后才能進樣,,整個過程耗時很長且無法保證方法重現(xiàn)性,。雙三元液相色譜系統(tǒng)具有在線固相萃取功能,可以利用閥切換只將目標化合物從固相萃取柱轉移至分析柱進行分析,,起到很好的凈化效果,。系統(tǒng)配置圖參見圖2-11


色譜柱:分析柱Cnwsil Silica,5 µm,,4.6×250mm,, P/N:LAEQ-1825004605; SPE柱Acclaim HILIC-10,,3 µm,,3×150mm,P/N:074258,;柱溫:30 ℃,;富集泵:流動相A:正己烷;流動相B:異丙醇,;富集泵流動相條件及閥切換時間參考表2-8

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分析泵:流動相A:正己烷,;流動相B:正戊醇;分析泵流速:1.0 mL/min,;分析泵等度:A:B=991:9(離線混合),;檢測方式:紫外檢測器,波長254 nm,;進樣量:20 µL,;樣品前處理方法:精密稱取維生素AD膠囊中油狀成分1.0 g于100 mL錐形瓶中,加乙醇30 mL,、維生素C 0.2 g與50%氫氧化鉀溶液3mL,,置水浴上加熱回流30 min,冷卻后,,自冷凝管頂端加水10 mL沖洗冷凝管內壁,,將皂化液移至分液漏斗中,皂化瓶用水100 mL分數(shù)次洗滌,洗液并入分液漏斗中,,用正己烷振搖萃取3次,,合并正己烷液,用水洗滌數(shù)次,,直至水層遇酚酞不再顯紅色,,靜置,分取正己烷萃取液,,水浴中減壓蒸干,,以正己烷溶解并定容至10 mL量瓶中,作為供試品溶液,,搖勻,待用,。未用完溶液放入4 ℃冰箱保存,。樣品測定譜圖見圖2-12。樣品經過皂化處理后,,去除了大量干擾成分,。前維生素D達到了基線分離,UV掃描圖比較均勻,,方法專屬性較好,。通過前處理與雙三元液相色譜相結合,很好地解決了復雜基質的干擾,,對待測組分達到了很好的測定,。

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