興奮劑在體育界不特指某一類具有興奮作用的藥物,而是在競技體育中禁止使用的所有物質(zhì)和方法的統(tǒng)稱,。興奮劑的使用不僅損害奧林匹克精神,,破壞競技比賽公平的原則,而且嚴(yán)重危害運(yùn)動員身體健康,,因此對運(yùn)動員進(jìn)行興奮劑檢測是比賽非常重要的一項(xiàng)內(nèi)容,。
在北京冬奧會上,干血點(diǎn)檢測成為常規(guī)興奮劑檢測手段,。干血點(diǎn)(指將一滴血滴在專用卡紙上,,干燥后形成的斑點(diǎn))即DBS(Dried Blood Spot)與傳統(tǒng)的血檢方式相比,DBS依從性高,,損傷極小,,可操作性強(qiáng),由于血液滴在卡紙上迅速變成固態(tài),,因此也更加安全穩(wěn)定,,方便后期的運(yùn)輸和儲存。
賽默飛世爾科技致力于幫助客戶使世界更健康,,更清潔,,更安全。Transcend DSX-1系統(tǒng)包括干斑自動進(jìn)樣器和TurboFlow-超高壓液相色譜儀,,能實(shí)現(xiàn)干基質(zhì)點(diǎn)樣本的全自動流式化合物解析,、在線樣品凈化,Transcend DSX-1結(jié)合三重四極桿質(zhì)譜構(gòu)建了一整套完善的xing奮劑檢測方案(見圖1),,該系統(tǒng)可以快速定量多種干斑基質(zhì)中qu馬多(一種合成阿片類藥物,,具有中樞鎮(zhèn)痛作用,廣泛用于緩解急性或慢性疼痛)及其代謝物(O-去甲基qu馬多,,N-去甲基qu馬多),,測試的干斑基質(zhì)包括尿液,、血液、血清,、唾液和水(作為標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)),,以同位素內(nèi)標(biāo)進(jìn)行內(nèi)標(biāo)定量,定量參數(shù)如表1所示,,干血斑樣本在分析前,、后的對比圖和典型干血斑定量下限濃度點(diǎn)的色譜圖見(圖2),該方法在各種基質(zhì)中的線性范圍為5-400ng/mL,。
圖1 Transcend DSX-1 系統(tǒng)結(jié)合 TSQ Altis 質(zhì)譜
表1qu馬多(Tramadol),、O-去甲基qu馬多(O-desmethyltramadol)、N-去甲基qu馬多(N-desmethyltramadol)和對應(yīng)三個(gè)同位素內(nèi)標(biāo)(Tramadol-13C-d3,、O-desmethyltramadol-d6,、N-desmethyltramadol-d3)的定量參數(shù)
圖2 干血斑樣本在分析前、后的對比圖和典型干血斑定量下限濃度點(diǎn)的色譜圖
TurboFlow在線樣本凈化技術(shù)
UHPLC搭載TurboFlow技術(shù)實(shí)現(xiàn)全自動在線樣本凈化和色譜分離,,其中用到了兩根色譜柱,,分別是Cyclone-P(0.5×50mm)和biphenyl分析柱(3×50mm,2.6μm),。TurboFlow方法配置為“Focus”模式,,在待測物進(jìn)入分析柱之前,優(yōu)化好的溶劑填充管路,,以有效洗脫TurboFlow柱上的分析物,,整個(gè)分析過程和通路走向分為以下四步(圖3):
1、樣本載入TurboFlow色譜柱
2,、從TurboFlow柱上洗脫分析物并將其轉(zhuǎn)入分析柱
3,、分析物在分析柱上分離,同時(shí)沖洗TurboFlow柱
4,、平衡分析柱,、TurboFlow柱以及管路
圖3 TurboFlow在線樣本凈化
該方法用到的流動相組成和梯度設(shè)置詳見下表2。
表2 液相條件
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