戴安液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,，又分為液-液色譜及液-固色譜。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵,、進(jìn)樣系統(tǒng),、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱,、檢測器,、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,，具有高效,、快速、靈敏等特點(diǎn),。
工作原理：
系統(tǒng)由儲液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,，被流動相載入色譜柱內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),，在兩相中作相對運(yùn)動時(shí),，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來戴安液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),，下面將分別敘述其各自的組成與特點(diǎn)。
進(jìn)樣系統(tǒng)：
一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作,，進(jìn)樣量是恒定的,。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
輸液系統(tǒng)：
該系統(tǒng)包括高壓泵,、流動相貯存器和梯度儀三部分,。高壓泵的一般壓強(qiáng)為l.47～4.4X10Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定,，當(dāng)高壓流動相通過層析柱時(shí),，可降低樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，可加快其在柱中的移動速度,，這對提高分辨率,、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的,。流動相貯存器和梯度儀,，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性,、離子強(qiáng)度,、PH值,，或改用競爭性抑制劑或變性劑等,。這就可使各種物質(zhì)都能獲得有效分離。
分離系統(tǒng)：
該系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等,。色譜柱一般長度為10～50cm,，內(nèi)徑為2～5mm，由不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械強(qiáng)度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,，它們都有惰性、多孔性和比表面積大的特點(diǎn),，加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬,，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因或配體的有機(jī)化合物。因此,，這類固定相對結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性,。例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素后,，就可以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白分離出來,。
另外，固定相基質(zhì)粒小,，柱床極易達(dá)到均勻,、致密狀態(tài)，極易降低渦流擴(kuò)散效應(yīng),?；|(zhì)粒度小，微孔淺,，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短,。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析,，基質(zhì)粒度小，塔板理論數(shù)N就越大,。這也進(jìn)一步證明基質(zhì)粒度小,，會提高分辨率的道理。
再者,，高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C,，通過改善傳質(zhì)速度，縮短分析時(shí)間,，就可增加層析柱的效率,。
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