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三重四極桿TSQ Fortis 針對(duì)18種β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè)方法

閱讀:871      發(fā)布時(shí)間:2021-6-21
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本文利用賽默飛全新液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜Vanquish Horizon-TSQ Fortis建立了快速檢測(cè)18種β-受體激動(dòng)劑類(lèi)化合 物的方法,。此18種化合物在0.05-500 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān) 系良好(r2>0.993), LOD及LOQ均能滿足國(guó)標(biāo)規(guī)定的檢測(cè)要 求,,運(yùn)用本方法和設(shè)備可實(shí)現(xiàn)對(duì)動(dòng)物源性食品中β-受體激動(dòng)劑 類(lèi)化合物的檢出和定量,。

 

1、引言 β -受體激動(dòng)劑在醫(yī)學(xué)臨床上可用于治療支氣管哮喘,、阻塞性 肺炎等病癥,,同時(shí)也可用于治療馬、牛的晚產(chǎn)和流產(chǎn),。 20世紀(jì) 80年代初期,,一系列試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)β-受體激動(dòng)劑使用劑量 是治療劑量5-10倍時(shí),可以使豬,、牛,、羊等動(dòng)物脂肪分解代謝 增強(qiáng),,蛋白質(zhì)合成速度增加,若長(zhǎng)期使用含有β-受體激動(dòng)劑的 飼料,,可以提高飼料轉(zhuǎn)化率,,同時(shí)能增加動(dòng)物體重和肌肉組織 含量,以提高瘦肉率,,起到營(yíng)養(yǎng)再分配作用,。但是長(zhǎng)期使用會(huì) 對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒副作用。目前豬,、牛,、羊等動(dòng)物通常使用過(guò)量的 β-受體激動(dòng)劑類(lèi)藥物以促進(jìn)生長(zhǎng),致使β-受體激動(dòng)劑在動(dòng)物 機(jī)體內(nèi)造成蓄積,。人類(lèi)食用含有β-受體激動(dòng)劑殘留的動(dòng)物性食 品后,會(huì)對(duì)人體健康造成極大危害,,嚴(yán)重時(shí)可引發(fā)急性中毒反 應(yīng),,常見(jiàn)中毒癥狀表現(xiàn)為肌肉震顫或疼痛,心率過(guò)快,,頭痛眩 暈,、嘔吐等,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致休克造成死亡,。 由于β-受體激動(dòng)劑所產(chǎn)生的危害,, 2012年5月1日實(shí)施的《飼 料和飼料添加劑管理?xiàng)l例》規(guī)定禁止將國(guó)務(wù)院農(nóng)業(yè)行政部門(mén)公 布的包括β-受體激動(dòng)劑在內(nèi)的任何物質(zhì)添加到飼料中。國(guó)家標(biāo) 準(zhǔn)《動(dòng)物源性食品中多種β-受體激動(dòng)劑殘留量的測(cè)定液相色譜 串聯(lián)質(zhì)譜法》(GB/T 22286-2008)適用于豬肝和豬肉中沙丁胺醇,、特布他林和塞曼特羅等11種β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè),,該方 法利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模 式檢測(cè),,內(nèi)標(biāo)法定量,,目標(biāo)物的檢出限為0.5 μg/kg。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 《河豚魚(yú),、河鰻和烤鰻中12種β-受體激動(dòng)劑殘留量的測(cè)定 液 相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》(GB/T 22950-2008)適用于河豚魚(yú),、河 鰻和烤鰻中溴布特羅、塞曼特羅和克倫特羅等12種β-受體激 動(dòng)劑的確證和定量,,利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè),,采用多反 應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式檢測(cè),內(nèi)標(biāo)法定量,;萊克多巴胺,、沙丁胺 醇、塞曼特羅,、克侖潘特羅和克倫特羅的方法檢出限為0.1 μg/ kg,,其它化合物的方法檢出限為0.5 μg/kg。

 

2. 實(shí)驗(yàn)部分 2.1 儀器與試劑 2.1.1 Thermo Fisher Vanquish Binary Horizon超高效液相色譜儀 2.1.2 Thermo Fisher TSQ Fortis三重四極桿質(zhì)譜儀 2.1.3 甲醇(色譜純,美國(guó)Thermo Fisher公司),;實(shí)驗(yàn)用水為 Milli-Q去離子水,;甲酸(色譜純, SIGMA) 2.1.4 18種β-受體激動(dòng)劑類(lèi)化合物標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自德國(guó) Dr.Ehrenstrofer公司 2.2 化合物信息及溶液配制 2.2.1 本實(shí)驗(yàn)涉及的18種β-受體激動(dòng)劑類(lèi)化合物的基本信息見(jiàn) 表1,。

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2.2.2 儲(chǔ)備液:分別精確稱取5 mg標(biāo)準(zhǔn)品粉末,,溶解于50 mL甲 醇中 2.2.3 系列標(biāo)準(zhǔn)曲線:以50:50 甲醇水作為溶劑,稀釋成系列標(biāo) 準(zhǔn)曲線 0.02 ng/mL-500 ng/mL 2.3 色譜條件: 色譜柱: Thermo Hypersil GOLD aQ(1.9 µm, 100 x 2.1 mm) ,;柱溫: 30℃,;進(jìn)樣量: 5 µL; 流動(dòng)相: A為0.1%甲酸水,, B為0.1%甲酸甲醇,,梯度洗脫程序 見(jiàn)表2

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2.4 質(zhì)譜條件: 可加熱電噴霧電離源(HESI),正離子掃描模式,;掃描方 式: SRM,;噴霧電壓 (+): 3500V;離子傳輸管溫度: 300℃,; 鞘氣壓力38 arb,;輔助氣壓力 4 arb;離子源溫度: 450℃,;碰 撞氣壓力: 1.5 mTorr,;選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)離子對(duì)信息見(jiàn)表3。 表3 18種β-受體激動(dòng)劑類(lèi)化合物質(zhì)譜采集參數(shù)

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3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 3.1 靈敏度測(cè)試 采用上述儀器分析方法,, 18種β-受體激動(dòng)劑類(lèi)化合物在16分 鐘內(nèi)均可獲得良好的色譜峰,,圖1為18種β-激動(dòng)劑類(lèi)化合物在 LOQ(0.05-0.1 ng/mL)濃度的提取離子流圖。

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