引言：維生素是人和動(dòng)物為維持正常的生理功能而必需從食 物中獲得的一類(lèi)微量有機(jī)物質(zhì),，在人體生長(zhǎng)、代謝,、發(fā) 育過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用,，在食品、保健品及藥品 中的測(cè)定也變得越來(lái)越頻繁,。維生素是個(gè)龐大的家族,，目前所知的維生素就有幾十種，大致可分為脂溶性和水 溶性?xún)纱箢?lèi),。高效液相色譜法作為一種快速分離,、能同 時(shí)測(cè)定多種物質(zhì)的儀器分析方法，在多種維生素同時(shí)測(cè) 定方面具有*的優(yōu)勢(shì),。但是由于水溶性維生素和脂溶 性維生素性質(zhì)差異很大,，所以很少將其在同一個(gè)方法里 進(jìn)行檢測(cè)。
本方法采用 Thermofisher 的針對(duì)極性化合物有特殊選擇性 的 Acclaim PolarAdvantage II C18 色譜柱,，可以很有效的將 9 種水溶性維生素得到很好的保留和分離,，同時(shí)能夠在大有機(jī)相存在的情況下，對(duì)脂溶性維生素得到很好的洗脫 和分離,，實(shí)現(xiàn)了一個(gè)方法解決兩類(lèi)性質(zhì)差異很大的維生 素的同時(shí)分離。
儀器配置 Thermo Ultimate 3000 系統(tǒng)： 泵：DGP-3600 自動(dòng)進(jìn)樣器：WPS-3000SL 柱溫箱：TCC-3000 檢測(cè)器：DAD-3000 色譜軟件：Chromeleon 7.1
測(cè)定條件 分析柱： Acclaim PolarAdvantage II C18, 4.6×250mm, 5µm, PN: 063199, SN: 001461 流動(dòng)相： A：0.025%TFA 的水,；B：乙腈,；C：甲醇； 梯度見(jiàn)表 1. 進(jìn)樣量：10µL 柱溫：室溫 檢測(cè)器波長(zhǎng)：見(jiàn)表 2.
樣品處理 按照注射液凍干劑說(shuō)明要求,，向其中加入 5mL 超純水,， 使其充分溶解，將溶解后的注射液通過(guò) 0.22 μm 尼龍濾膜 過(guò)濾后,，使用超純水稀釋 10 倍,，待測(cè)。
實(shí)際樣品分析 按照樣品處理方法測(cè)定了注射液樣品,，測(cè)定結(jié)果如下：
討論與建議：本實(shí)驗(yàn)針對(duì)注射液的特點(diǎn),，將 9 種水溶性維生素和 3 種脂 溶性維生素放在同一個(gè)分析方法里進(jìn)行檢測(cè)，從結(jié)果中 可以看到分析結(jié)果良好,。而因?yàn)樗芤褐芯S生素C不穩(wěn)定,， 所以有隨著時(shí)間推移峰面積減少的現(xiàn)象,，所以推薦對(duì)于 維生素 C 的分析需要現(xiàn)做現(xiàn)配樣品。 因?yàn)樗苄跃S生素比較易溶于水,，而脂溶性維生素必須 溶解在有機(jī)溶劑里,，而且如果有機(jī)溶劑中出現(xiàn)比較少的 水也會(huì)導(dǎo)致脂溶性維生素的析出以及影響水溶性維生素 中四水合輔羧酶、核黃素和煙酰胺的峰形,，所以標(biāo)準(zhǔn)品 中分別將水溶性維生素和脂溶性維生素分開(kāi)混合測(cè)量,。 因?yàn)闃悠窞閮龈蓜野凑帐褂靡?5mL 超純水溶解后 依然濃度很高,，所以再次將樣品稀釋 10 倍后進(jìn)行分析,。
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