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同時分離注射液中 12 種水溶性和脂溶性維生素(LC-UV)

閱讀:929      發(fā)布時間:2021-1-20
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引言:維生素是人和動物為維持正常的生理功能而必需從食 物中獲得的一類微量有機物質(zhì),,在人體生長、代謝,、發(fā) 育過程中發(fā)揮著重要的作用,,在食品、保健品及藥品 中的測定也變得越來越頻繁,。維生素是個龐大的家族,,目前所知的維生素就有幾十種,大致可分為脂溶性和水 溶性兩大類,。高效液相色譜法作為一種快速分離,、能同 時測定多種物質(zhì)的儀器分析方法,在多種維生素同時測 定方面具有*的優(yōu)勢,。但是由于水溶性維生素和脂溶 性維生素性質(zhì)差異很大,,所以很少將其在同一個方法里 進行檢測。

 

本方法采用 Thermofisher 的針對極性化合物有特殊選擇性 的 Acclaim PolarAdvantage II C18 色譜柱,,可以很有效的將 9 種水溶性維生素得到很好的保留和分離,,同時能夠在大有機相存在的情況下,對脂溶性維生素得到很好的洗脫 和分離,,實現(xiàn)了一個方法解決兩類性質(zhì)差異很大的維生 素的同時分離,。

 

儀器配置 Thermo Ultimate 3000 系統(tǒng): 泵:DGP-3600 自動進樣器:WPS-3000SL 柱溫箱:TCC-3000 檢測器:DAD-3000 色譜軟件:Chromeleon 7.1

測定條件 分析柱: Acclaim PolarAdvantage II C18, 4.6×250mm, 5µm, PN: 063199, SN: 001461 流動相: A:0.025%TFA 的水;B:乙腈,;C:甲醇,; 梯度見表 1. 進樣量:10µL 柱溫:室溫 檢測器波長:見表 2. 

 

樣品處理 按照注射液凍干劑說明要求,向其中加入 5mL 超純水,, 使其充分溶解,,將溶解后的注射液通過 0.22 μm 尼龍濾膜 過濾后,使用超純水稀釋 10 倍,,待測,。

實際樣品分析 按照樣品處理方法測定了注射液樣品,測定結(jié)果如下:

討論與建議:本實驗針對注射液的特點,,將 9 種水溶性維生素和 3 種脂 溶性維生素放在同一個分析方法里進行檢測,,從結(jié)果中 可以看到分析結(jié)果良好,。而因為水溶液中維生素C不穩(wěn)定, 所以有隨著時間推移峰面積減少的現(xiàn)象,,所以推薦對于 維生素 C 的分析需要現(xiàn)做現(xiàn)配樣品,。 因為水溶性維生素比較易溶于水,而脂溶性維生素必須 溶解在有機溶劑里,,而且如果有機溶劑中出現(xiàn)比較少的 水也會導致脂溶性維生素的析出以及影響水溶性維生素 中四水合輔羧酶,、核黃素和煙酰胺的峰形,所以標準品 中分別將水溶性維生素和脂溶性維生素分開混合測量,。 因為樣品為凍干劑,,且按照使用要求 5mL 超純水溶解后 依然濃度很高,所以再次將樣品稀釋 10 倍后進行分析,。

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