戴安離子色譜儀的原理是輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送到分析系統(tǒng)中,。在色譜柱之前,,樣品將被引入樣品注射器。流動相將樣品帶入色譜柱,,分離柱內(nèi)各成分,然后與流動相依次流向檢測器,。在抑制型離子色譜法中,,在電導(dǎo)檢測器前增加一個抑制系統(tǒng),即用另一個高壓輸液泵將再生液輸送至抑制器,。在抑制器中,,降低流動相的背景電導(dǎo)率,然后將流出物引入電導(dǎo)率檢測單元,,并將檢測到的信號發(fā)送給數(shù)據(jù)系統(tǒng)進(jìn)行記錄,、處理或保存。
離子色譜法是一種高效液相色譜法,,又稱高效離子色譜法或現(xiàn)代離子色譜法,。與傳統(tǒng)的離子交換色譜柱色譜不同,樹脂交聯(lián)度高,,交換容量低,,進(jìn)樣量小。采用柱塞泵輸送洗脫液時,,通常對洗脫液進(jìn)行在線自動連續(xù)電導(dǎo)率檢測,。

水中常見糖類的pKa值。可見,,常見單糖,、雙糖和糖醇的pKa值一般在L2~14之間,常見的糖醛酸和糖胺的pKa值小于7,。當(dāng)堿性溶液的pH值大于或等于L2時,,大多數(shù)糖基化物以陰離子的形式存在,因此陰離子交換色譜柱可作為洗脫液分離強(qiáng)堿性溶液,。
由于糖分子結(jié)構(gòu)中的疏水部分,,糖的分離機(jī)理不僅是陰離子交換,而且是疏水吸附,。糖類化合物在陰離子交換柱上的保留容量主要取決于其電荷數(shù),、分子大小、組成和結(jié)構(gòu),。
安培檢測是一種在適當(dāng)?shù)耐饧与娢幌?,測量電化學(xué)活性物質(zhì)發(fā)生氧化或還原反應(yīng)時電流變化的檢測技術(shù)。糖的分離是在堿性條件下完成的,,而金電極的檢測條件通常是堿性的,,金電極表面可以為糖的電化學(xué)氧化提供反應(yīng)環(huán)境。因此,,金電極的檢測與陰離子交換分離有很好的匹配性,。由于糖的氧化產(chǎn)物會覆蓋電極表面,造成不可逆的污染,,因此需要選擇不同的外加電位對電極表面進(jìn)行清洗和活化,,使電極能夠連續(xù)工作,即脈沖安培檢測,。
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