生物制藥微課堂｜宿主細(xì)胞殘留蛋白分析,，如何獲得更佳結(jié)果,？
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LCMS分析方法越來越多的用于宿主細(xì)胞殘留蛋白（HCP）的分析,，HCP分析的難點(diǎn)見往期微信稿“生物制藥微課堂|第二期-宿主細(xì)胞殘留蛋白如何分析,？”,。如何獲得優(yōu)秀的基于LC-MS的HCP分析結(jié)果? 答案將在本期分享的兩場(chǎng)關(guān)于HCP的LCMS分析的網(wǎng)絡(luò)講座,，每場(chǎng)都有詳細(xì)的樣品前處理,，LCMS方法和數(shù)據(jù)處理的詳細(xì)介紹,，可謂干貨滿滿,，供有需求的老師參考,。
Webinar 1:
Data Visualizations for Routine Host Cell Protein Analysis by LCMS
講師介紹
博士：
Andrew Williamson
賽默飛生物制藥銷售專家
Andrew Williamson博士是賽默飛生物制藥銷售專家,。在此之前,，Andrew在賽默飛公司擔(dān)任蛋白質(zhì)組學(xué)專家，此前他在曼徹斯特大學(xué)克里斯蒂醫(yī)院的蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作并管理該實(shí)驗(yàn)室。在此期間,，安德魯從事了許多基于腫瘤項(xiàng)目的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,，研究zhi療的關(guān)鍵指標(biāo)和生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn),。在此期間，Andrew還與合作者合作分析了多種干細(xì)胞和癌癥樣本,，包括小鼠,、人和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,。
講師介紹
博士：
Michelle English
Protein Metrics Inc.
的成功科學(xué)家
Michelle English 博士是Protein Metrics Inc.的客戶成功科學(xué)家，在該公司,，她專注于幫助客戶使用質(zhì)譜對(duì)早期和后期產(chǎn)品表征,。在加入Protein Metrics公司之前,，Michelle是輝瑞公司的一名科學(xué)家，并在弗吉尼亞大學(xué)的Hunt實(shí)驗(yàn)室工作。
看點(diǎn)：
HCP的完整解決方案及可視化的數(shù)據(jù)展示
生物藥生產(chǎn)過程中會(huì)產(chǎn)生產(chǎn)品不需要的宿主細(xì)胞殘留蛋白(HCP),，大部分HCP可以通過純化去除,。監(jiān)管指南規(guī)定在上市前必須確定生物藥中殘留的HCP水平。LC-MS技術(shù)在過去幾年中得到了快速發(fā)展,，但迄今為止該技術(shù)對(duì)分析人員專業(yè)技能要求高和需要對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行手工分析,。分析挑戰(zhàn)包括樣品寬動(dòng)態(tài)范圍，極低的HCP豐度,，差的序列覆蓋率,，等等。此外,，假陽性和假陰性一樣危險(xiǎn),，會(huì)造成不能重現(xiàn)，這也阻礙了LC-MS成為常規(guī)的HCP分析手段,。
講座關(guān)鍵點(diǎn)：
01.為什么LC-MS在生物藥分析中越來越常用
02.如何對(duì)非質(zhì)譜專家用戶有效的展示數(shù)據(jù)
03.如何更快提供可信的結(jié)果
該報(bào)告詳細(xì)介紹了樣品前處理方法,、LC-MS方法和數(shù)據(jù)處理。非變性SMART Digest酶解能去除大部分主成分,，提高HCP鑒定的數(shù)目,。高靈敏度和采集速度快的Orbitrap Exploris 480 質(zhì)譜儀進(jìn)一步提高HCP鑒定數(shù)目，并且重現(xiàn)性好,。軟件Proteome Discoverer和Protein metrics用于數(shù)據(jù)的分析,，得到可視化好的HCP鑒定和相對(duì)定量的結(jié)果和報(bào)告。
流程化的數(shù)據(jù)處理
（點(diǎn)擊查看大圖）
Webinar 2:
A Data-Independent Acquisition (DIA) library based approach for Host cell protein analysis on the Thermo Scientific Orbitrap platform
講師介紹
博士：
Ian Anderson
賽默飛生物制藥銷售專家
Ian Anderson博士在Allergan工作了6年多,，專注于從抗體到基因zhi療載體等多種生物制藥產(chǎn)品的質(zhì)譜鑒定。在此之前,，他在SGS-M-Scan工作,，開發(fā)用于表征生物藥品和生物仿制藥的新型質(zhì)譜方法,。
看點(diǎn)：
基于DIA采集模式的HCP分析
現(xiàn)在用于HCP分析方法，絕大部分用的是數(shù)據(jù)依賴性采集（DDA）的方法,。數(shù)據(jù)非依賴性采集（DIA）與DDA相比,，不丟失任何信息、靈敏度更高,，適合用于HCP分析。該報(bào)告講解了基于Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos三合一質(zhì)譜儀和Orbitrap Exploris 480質(zhì)譜儀開發(fā)HCP的DIA方法,，以及如何在兩個(gè)質(zhì)譜系統(tǒng)設(shè)置合適參數(shù)。該報(bào)告將詳細(xì)介紹好的HCP數(shù)據(jù)庫(kù)如何建立以及構(gòu)建該庫(kù)的zui佳方式，并列舉了如何在生物制藥過程開發(fā)中使用該方法的例子,。
講座關(guān)鍵點(diǎn)：
01.討論基于高分辨質(zhì)譜平臺(tái)的HCP分析方法
02.演示使用DIA方法進(jìn)行HCP的分析
03.該方法在生物制藥開發(fā)過程中應(yīng)用
DIA分析LCMS平臺(tái)
本報(bào)告詳細(xì)介紹了DIA采集模式用于HCP分析的方法建立,。DDA是好的建立譜圖庫(kù)的數(shù)據(jù)采集模式,，數(shù)據(jù)不丟失、高靈敏度的DIA采集的數(shù)據(jù)可以檢索該譜圖庫(kù)從而得到可信的HCP鑒定結(jié)果,。本報(bào)告對(duì)DDA和DIA的質(zhì)譜參數(shù)設(shè)置進(jìn)行了詳細(xì)的解讀,，且該方法可以在Orbitrap Fusion Lumos三合一質(zhì)譜儀和Orbitrap Exploris 480質(zhì)譜儀相互轉(zhuǎn)移,，表明該方法的穩(wěn)健性好,、重復(fù)性好。
DIA 用于HCP分析的實(shí)驗(yàn)流程
（點(diǎn)擊查看大圖）
使用Orbitrap高分辨質(zhì)譜平臺(tái)Exploris 480和Orbitrap Fusion Lumos，能夠?qū)崿F(xiàn)鑒定靈敏度及動(dòng)態(tài)范圍的進(jìn)一步提高,。那么如何進(jìn)行合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),？質(zhì)譜方法的參數(shù)設(shè)置？鑒定結(jié)果可做到什么程度,？這些問題都會(huì)在以上報(bào)告中給出答案,，精彩不要錯(cuò)過,！
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