近年來,，有機酸的使用在制藥和食品領(lǐng)域越來越普遍，在食品中常用的有機酸主要有乳酸,，檸檬酸,，酒石酸，蘋果酸等,，常被作為營養(yǎng)物質(zhì),。在制藥領(lǐng)域，常用的有機酸主要有乙酸,、三氟yi酸,、甲酸等，常被作為有機合成的原料,，因此不管是食品還是制藥領(lǐng)域有機酸的檢測都是有關(guān)部門重點關(guān)注的課題,。
有機酸是一類廣泛存在于自然界的有機物，很多樣品基體中都已測出不同種類不同含量的有機酸,。目前常用測定方法有 HPLC 法,、 IC 法和衍生化 GC 方法,。
目前液相色譜法（HPLC）是有機酸廣泛的檢測方法，其分離模式是與檢測方法多種多樣,，可以根據(jù)樣品的構(gòu)成與性質(zhì)來選擇合適的色譜條件,，有機酸在水中很容易發(fā)生電離，產(chǎn)生多峰現(xiàn)象,。為了使有機酸盡可能的以分子形式存在,，一般使用酸性流動相來抑制有機酸的解離。通常在流動相中加入磷酸鹽緩沖液,、冰醋酸,、磷酸等，但小分子有機酸由于極性較強,，通常在C18色譜柱上保留較弱,，分離較差，本實驗使用新型復(fù)合模式色譜柱,，建立了3種有機酸的液相色譜分析方法,，可得到良好的分析結(jié)果。
樣品處理：
稱取多肽藥物樣品20mg于10mL具塞比色管中,，加水至10mL,，超聲提取20min，取適量樣品在10000rpm下高速離心15min,，取上清液過0.45μm的濾膜后作為待測溶液。
色譜條件
復(fù)合模式色譜柱原理：
Acclaim®Mixed-Mode WAX-1色譜柱基于新型混合模式硅膠填料,，具有疏水和弱陰離子交換性能,。與傳統(tǒng)的反相固定相不同，新型填料具有帶可電離末端的烷基長鏈,，并且具有很大的潛力,，可用于分離各種含有混合物的陰離子化合物，包括藥物,，食品和飲料,，化學(xué)品等。
實驗結(jié)果：
采用上述儀器分析方法,，對3種有機酸進行線性范圍測試,，線性相關(guān)系數(shù)r2均大于0.999，線性關(guān)系良好,。3種有機酸線性范圍,、線性相關(guān)系數(shù)、LOD（S/N>3）及LOQ（S/N>10)結(jié)果見表1,，化合物線性方程圖見圖1,。
標(biāo)準(zhǔn)品及樣品分析:
圖2.3種有機酸標(biāo)準(zhǔn)品譜圖（濃度100μg/mL）
圖3.多肽藥物樣品及3種有機酸標(biāo)準(zhǔn)品對比譜圖
多肽原料藥在合成過程中使用了乙酸、三氟yi酸，需要對乙酸及三氟yi酸的含量進行控制,，所以對多肽樣品中乙酸,、三氟yi酸殘留量進行測定,在實際樣品測試中，乙酸被檢出,，其他物質(zhì)未被檢出,，經(jīng)計算乙酸在樣品中濃度為5.6ug/ml,含量為0.28%，符合*,。
結(jié)論:
本文建立了液相色譜方法結(jié)合新型復(fù)合模式色譜柱對3種有機酸的檢測方法,。由實驗結(jié)果可以看出，基于Thermo Fisher UltiMate 3000 液相色譜儀結(jié)合Acclaim® Mixed-Mode WAX-1 色譜柱的檢測方法具有優(yōu)異的靈敏度,、穩(wěn)定性和線性范圍,，可用于有機酸在制藥和食品領(lǐng)域的常規(guī)分析檢測。
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