液相色譜儀的萌芽在國外,,所以國產(chǎn)液相色譜儀的科技含量起初是遠遠落后于進口液相色譜儀的,但是隨著我國科技技術(shù)的進步,,以及眾多液相色譜儀廠家的共同努力,,為我國液相色譜儀,液相色譜儀行業(yè)貼磚加瓦,,使得產(chǎn)品技術(shù)上不斷提升,!
液相色譜儀歷史回顧
追溯到1960年代,由于液相色譜對高沸點有機物分析的局限性,,為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),,液相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜,。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯,、荷瓦斯(Horvath),、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上*臺液相色譜儀,,開啟了液相色譜儀的時代,。液相色譜儀使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數(shù),,以高壓驅(qū)動流動相,,使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成。
液相色譜儀現(xiàn)狀分析
如今液相色譜儀可以固定相基質(zhì)粒小,,柱床極易達到均勻,、致密狀態(tài),極易降低渦流擴散效應(yīng),?;|(zhì)粒度小,微孔淺,,樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短,。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的,。根據(jù)柱效理論分析,,基質(zhì)粒度小,塔板理論數(shù)N就越大,。這也進一步證明基質(zhì)粒度小,,會提高分辨率的道理,。
液相色譜儀操作說明
液相色譜儀在使用混合溶劑作流動相時,一定要先混合,,再過0.45um濾膜;等流動相恢復(fù)至室溫,,用超聲波或He氣進行脫氣處理后,方可使用,。液相色譜儀更換流動相時,,必須按一定的程序進行,否則會產(chǎn)生問題,。更換流動相有三種情況:互溶性流動相的更換,、無互溶性流動相的更換和緩沖溶液的更換。對于*種情況,,先用準(zhǔn)備更換的流動相把吸濾器*清洗干凈,,再打開儀器的排液閥,按清洗鍵,,清洗泵中的流動相,。
液相色譜儀清洗解說
將吸濾器放入新流動腥中,減慢流速清洗數(shù)分鐘后關(guān)閉排液閥,。接下來清洗液相色譜儀色譜柱和檢測器檢測池直到基線平穩(wěn),。對于第二種情況,先用與新舊流動相都互溶的中間清洗液(如:異丙醇)清洗,,再用新流動相清洗,,具體過程與*種情況相同。對于第三情況,,應(yīng)先用蒸餾水作為中間清洗液進行清洗,,再用新流動相清洗即可。
液相色譜儀系統(tǒng)詳解
液相色譜儀系統(tǒng)由儲液器,、泵,、進樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。儲液器中液相色譜儀的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中作相對運動時,,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,,通過檢測器時,,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng),、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),。進樣系統(tǒng)一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,,進樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的,。
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