引言：低分子肝素（low-molecular-weight heparin， LMWH） 是近年發(fā)展起來的新一代肝素類抗血栓藥物,， 其抗血栓作用優(yōu)于肝素，而抗凝血作用低于肝素,，且具有 皮下注射吸收良好,、生物利用度高、體內(nèi)半衰期長,、出血 傾向小等優(yōu)點,，目前已廣泛應用于臨床。根據(jù)LMWH的來 源,、生產(chǎn)工藝,、末端結構的不同，LMWH 分為許多不同 的種類,，如達替肝素鈉,、依諾肝素鈉、那曲肝素鈣,、帕米 肝素鈉,、汀肝素鈉等。達替肝素鈉（Dalteparin Sodium） 是低分子肝素的一種,，由亞硝酸降解肝素得到,，重均分子 量5600～6400，峰位分子量6000,，硫酸化程度為2.0～ 2.5/雙糖單位[1],。 本實驗使用高效陰離子交換色譜法測定游離硫酸根含 量，靈敏度高,、選擇性好,、快速。
測試條件 儀器：ICS 1500離子色譜,； 分析柱：IonPac AS11,，250×4mm,； 保護柱：IonPac AG11，50×4mm,； 柱溫：30℃,； 淋洗液：3. 0 mmol/L 碳酸鈉溶液； 流速：1.50 mL/min,； 定量環(huán)：25 µL 抑制器：ASRS300 4 mm,，自循環(huán)模式，電流為23 mA 檢測方式：抑制型電導
樣品前處理 精密稱取達替肝素鈉20 mg,，加水溶解并稀釋至 10 mL,，過0.22 µm濾膜。
結果和討論：樣品濃度的選擇 達替肝素鈉為多糖,，在實驗條件下保留在色譜柱上,， 不能被洗脫。樣品濃度為2 mg/mL時,，連續(xù)進樣10次,，硫 酸根保留時間可提前0.3 min。為提高實驗的穩(wěn)定性,，延 長色譜柱使用時間,，可在滿足定量限的前提下，適當降低 達替肝素鈉的濃度,。 色譜柱的選擇及淋洗液梯度條件優(yōu)化 樣品中盡含有氯離子和硫酸根離子,，非常易于分離。 本實驗選用IonPac AS11色譜柱,、3.0 mmol/L碳酸鈉溶液 作為淋洗液,，操作簡單。
重現(xiàn)性,、線性和靈敏度 取達替肝素鈉樣品,，平行處理六份，在選定的色譜 條件下進行分離分析,，硫酸根的重現(xiàn)性較好,，峰面積、 保留時間,、峰高的相對標準偏差（RSD）均低于5%,。 選擇一個樣品重復六次進樣，硫酸根的保留時間,、峰面 積和峰高的相對標準偏差（RSD）均低于5%,，其結果 見表1。
在選定色譜條件下配制適宜濃度范圍的離子標準曲 線，硫酸根在0.1~40 mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關系,， 其線性相關系數(shù)r=0.9995,。在本實驗條件下，基線噪音 約為1.0 nS,，根據(jù)三倍基線噪音計算出方法對硫酸根的定 量限為31.7 µg/L,，折合樣品中硫酸根含量0.00015%。
結論 采用本方法可以方便,、快捷,、準確檢測達替肝素鈉 中的硫酸鹽，操作較為簡單,，方法重現(xiàn)性較好,，結果可 靠。本實驗所使用的色譜柱AS11同時可用于肝素鈉其它 檢測項目如多硫酸軟骨素等項目的檢測,。
參考文獻 [1] LI Jing( 李京) ,，F(xiàn)AN Hui-hong( 范慧紅) ，XU Kang-sen( 徐康森) ． Study on the current status and the quality standard of low－molecular－ weight heparin( 低分子肝素藥用現(xiàn)狀及質(zhì)量標準 概況) ．Chin J Biochem Pharm ( 中國生化藥物雜 志) ,， 2004,，2
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