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牛奶中抗生素的檢測方法
一,、 牛奶中抗生素的種類
β-內(nèi)酰胺類
屬于此類的抗生素的有青霉素類和頭孢霉素類,,常用于奶牛等家畜的個體臨床治療,,殘留在牛乳中,。
四環(huán)素類
常見種類有四環(huán)素,、金霉素,、土霉素,、強力霉素等,是一類廣譜抗生素,。
氨基糖苷類
常見種類有慶大霉素,、鏈霉素、二氫鏈霉素,、新霉素,、壯觀霉素等,是常用于家畜的氨基糖苷類抗生素,。
氯霉素類
包括以下三種化合物:氯霉素,,甲砜霉素,氟甲砜霉素,。這類藥物都是嚴格限制使用的獸藥,,有些國家禁止使用。
大環(huán)內(nèi)酯類
常見種類有紅霉素,、秦樂霉素,、林可霉素、螺旋霉素和鹽霉素等,。
磺胺類
常見種類有磺胺二甲嘧啶,、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶,、磺胺嘧啶等,,甲氧芐啶是磺胺增效劑,,不單獨使用。
二,、抗生素殘留的危害
抗生素的殘留對人體的健康,、生態(tài)平衡、奶制品價格及奶制品的貿(mào)易均有不同程度的危害,。
三,、牛奶中抗生素檢測方法
1.傳統(tǒng)的微生物檢測法
微生物檢測法出現(xiàn)較早,從出現(xiàn)至今,,大大改善了我國抗生素檢測手段的發(fā)展,,其測定原理是基于抗生素對微生物的生理機能、代謝具有一定的抑制效果,,與臨床應用保持一致,,相對而言,其耗費的時間久,,且存在著較大的誤差,,目前zui常應用的是TTC法、戴爾沃檢測(Delvotest SP)法,、BY法等,。
2.通用的檢測法
相對而言,其是上應用較早的通用測定方法,,也是我國制定的監(jiān)測方法,,其原理是:如果牛奶中含有抗生素,則加入菌種(嗜熱鏈球菌)經(jīng)培育2.5-3h后,,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發(fā)生還原反應,,所以樣品呈無色狀態(tài)。如果牛奶中不含抗生素,,則樣品呈紅色,。相對而言,這一方法費用較低,,但是耗時,,因此應用不算太廣,發(fā)展受到一定的限制,。
3.藍黃檢測法
該方法是一種廣譜的微生物抑制法,,相對而言,耗時短,,可以在短時間內(nèi)檢查出抗生素的殘留情況,,只要通過顏色對比既可以得出結(jié)論,通過這一檢測方法得到的檢測結(jié)果存在著一定的誤差,容易造成誤檢,,但是耗時短,,費用低。
4.現(xiàn)代儀器分析法
這一方法主要是借助現(xiàn)代儀器進行檢測,,測定其殘留的抗生素種類,zui常用的是色譜法,、熒光法,、毛細管電泳、色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術等,。運用不同的理論,,采用不同的手段進行檢測,提高檢測的標準,,加強檢測的質(zhì)量,。相對而言,該方法分離速度快,,,,實現(xiàn)自動化控制,可以檢測出抗生素的具體含量,,其結(jié)果更加準確,,但待檢樣品需經(jīng)一系列的預處理,繁瑣費時,,還必須有相應的價格昂貴的儀器設備,。一般在大型實驗室使用,適合于測定,。
5.生化免疫法
這是近年來隨著新科技的發(fā)展而逐漸發(fā)展起來的,,其是以抗原與抗體的特異性與可逆性進行結(jié)合,是一種分析就技術,?;驹砑揖褪强乖w的競爭性結(jié)合,可分為酶聯(lián)免疫測定法(ELISA),、熒光免疫測定法(FIA),、免疫分析技術與常規(guī)理化分析技術聯(lián)用的方法等。幾種方法各有優(yōu)缺點,,必須注重其綜合使用,,提高檢測的質(zhì)量與準確度。從其實踐的結(jié)果來看,,其對抗生素的殘留現(xiàn)狀檢測效果良好,,靈敏度*,達到ng級水平;檢測快速、專一性強,。相對而言,,此法具有高度的專一性,每檢測一種抗生素就要制備或購買相應的抗原或抗體,,導致檢測費用較高,。因此生化免疫檢測法不可能取代色譜或光譜等常規(guī)分析方法,只能作為其重要的補充,。
6.專一試劑盒法
所謂的專一試劑盒法就是根據(jù)含有芽孢桿菌的瓊脂培養(yǎng)基和PH指示劑在一定的溫度下進行培養(yǎng),,一般維持在65℃左右,孢子發(fā)育生長,,降低培養(yǎng)基pH值,,在pH指示劑的作用下,藍(紫)色變?yōu)榫G-黃色,。生鮮牛乳中的抗生素殘留使微生物生長和酸的產(chǎn)生受到抑制,,由于沒有酸生成,顏色將不會改變,。