血液中乙醇濃度的氣相色譜分析

過量飲酒已經(jīng)成為世界公共衛(wèi)生的主要問題,，目前我國對飲酒量檢測主要通過檢測血液中的乙醇濃度。

血液中乙醇濃度的測定有化學法,、傳感器法,、酶法和氣相色譜法等，其中氣相色譜法是目前使用較普遍的方法,。本文利用乙醇的易揮發(fā)性,，以叔丁醇為內標，用頂空自動進樣氣相色譜,，火焰離子化檢測器進行檢測,，建立的方法樣品用量少，操作簡便,，準確度高,，能對血液中的乙醇進行可靠分析。

１設備

氣相色譜儀：天津蘭博GC6500氣相色譜儀,，配FID檢測器,，頂空自動進樣器。

2 試劑

乙醇,，叔丁醇均為色譜純,。

3 分析步驟

3.1 標準曲線的繪制

　用移液槍分別取0.10 ml配制成不同濃度的乙醇標準溶液（0.10 mg/ml、0.20 mg/ml,、0.50 mg/ml,、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml,、3.00 mg/ml)加入預先加有0.50 ml叔丁醇內標工作液（濃度為0.04 mg/ml)的頂空自動進樣器樣品瓶內,，用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋，混勻,，置于頂空自動進樣器中加熱后測定,。以乙醇濃度為橫坐標，乙醇對叔丁醇的峰面積比為縱坐標,，繪制標準曲線,。

3.2 樣品分析

用移液槍移取0.10 mL待測血液樣品于預先加有0.50 ml叔丁醇內標工作液（濃度為 0.04 mg/ml)的頂空自動進樣器樣品瓶內，用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋,，混勻,，置于頂空自動進樣器中加熱后測定。

3.3色譜條件

色譜柱：GDX-102（60目～80目）填充色譜柱(2 m × 3 mm),；

載氣：高純氮氣,，流速20.0 ml/min；

氫氣：30 ml/min；空氣：300 ml/min,；尾吹氣：28 ml/min,；

進樣器溫度：150℃；檢測器溫度：250℃,；

柱溫：70℃,；

進樣量：1.0 ml，分流比：5:1,；

頂空條件：樣品瓶溫度70℃,，平衡時間15 min，進樣閥溫度：105℃,，管路溫度110℃,。

3.4結果與討論

在規(guī)定的色譜條件下進樣，以乙醇濃度為橫坐標,，對應的峰面積為縱坐標,，繪制工作曲線。建立的標準曲線為y=1.7092x+0.0468,，r＝0.998,。標準品色譜圖如圖1所示。

圖1 乙醇和叔丁醇色譜圖

空白血中分別加入不同量的乙醇后制成不同濃度的三份樣品,，以上面的條件每份樣品重復測定6次,，平均回收率在97.8% ～104.3%之間，RSD在2.0%以下,，結果見表1,。

表1 回收率與精密度試驗結果（n=6）

4結論

　　本文建立的自動頂空氣相色譜法測定血液中的乙醇方法，操作簡便,，準確度高,，能滿足血液中乙醇含量的檢驗要求，自動化程度高,，分析時間短,，適合批量樣品檢驗需求。