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液相色譜儀在各行業(yè)的應(yīng)用
①在細(xì)胞核中有種類繁多的甙及核甙酸,,可用不同的檢測器或酶轉(zhuǎn)移檢測器或利用酶反應(yīng)進(jìn)行定性測定,。用離子交換柱和緩沖游泳梯度淋洗,。C18柱用含磷酸的緩沖水溶液的梯度淋洗法均能得到滿意的結(jié)果。
②分析核酸近年來有關(guān)分析核酸的研究很多,,主要是分離RNA,、DNA及碎片。現(xiàn)在使用硅烷化的硅藻土或長碳鏈季胺鹽涂漬=在上面制成系列填充柱。已能分離t-RNA,r-RNA及DNV碎片,。有沒的緩沖液淋洗,,還可利用此技術(shù)做RNA碎片的序列分離制備工具,對生物研究起了重要的作用,。
③氨基酸,、肽、蛋白質(zhì)的分析,,氨基酸分析主要是制成熒光衍生物或酰氯的衍生物,,然后測定其序列。近來也可用液相色譜的柱后衍生物法測定其序列,。操作簡便,、速度快、深受歡迎,。用四烷基氯化胺肽形成離子對或凝膠色譜測定蛋白質(zhì),,其分離效果也很好。
④酶的分析,,酶是在血清及其他生理樣品中常有的反應(yīng)產(chǎn)物,,化學(xué)分析法操作不便,易造成誤差,,用色譜技術(shù)分析,,具有操作簡便、快速,、準(zhǔn)確的特點,。如測定堿性或酸性磷酸酶的含量,測定反應(yīng)產(chǎn)物中腺甙脫 胺酶的含量等,,目前對酶用色譜法分離分析的研究工作已開展很多,。
⑤糖的分析,糖的分析是其它方法較難完成的,。如把糖與硼酸緩沖液預(yù)選混合,,使生成糖-硼酸絡(luò)合離子,再進(jìn)行分離,??砂颜崛樘恰⑻J糖,、果糖,、阿拉伯糖、巖藻糖,、半乳糖,、山梨糖,、木糖、葡萄糖等幾十種,,全部分開,。也可用胺基柱分離各種天然產(chǎn)物中伯糖的各繃分。
醫(yī)藥方面
①分離分析藥物的組合含量:由于一種藥劑常含有多組分,,色譜方法是既能分離又能定量的方法,。如脂溶性維生素片,含有鉻維生素,,有C18柱及含1%碳酸銨的甲醇為流動相,。一次即可將各維生素B6、D1,、A,、E同時分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測得各組分的含量,。
②藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制:生產(chǎn)抗菌素時,,首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素,、四環(huán)素,、頭孢子菌素、紅霉素,、柔紅霉素,、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動相或用離子對法,,分析主體及其收產(chǎn)物的含量,。對普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測定,,對硝酸甘油可測定主體含量及其降解產(chǎn)物,,以便保證藥物的熱量。
③分析藥物在體內(nèi)的殘量:這是近來研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一,,如冬凌草甲素是植物中的一組分,,有抗癌效果,但是毒性大,。測定其在血清中含量很重要,,現(xiàn)在可用C18柱及甲醇水為流動相,測定處理后的血清樣品,,即可得到血中的含量,。如磺胺類藥品在血清及尿中含量也不允許太大,,可用C18柱及酸性乙醇為流動相,,測定含量后,,則可估計zui合適的用藥劑量。又如四環(huán)素,、巴比妥酸,、止痛藥、退燒藥,、護(hù)糖尿病的藥物等,,在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水為流動相來測定含量,。因此,,反相色譜法應(yīng)用范圍極廣。
④測定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物,,特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況,。如測血清中的酮酸及戊二酸。測尿中代謝產(chǎn)物更為方便,,不需要繁鎖的預(yù)處理,。因為研究尿中的組分能鑒別病人的代謝功能,對病理研究或監(jiān)床診斷均具有重要的參考價值,。
食品分析
分析食品或動物飼料中的嘌維生素含量,,是當(dāng)前食品工業(yè)中的重要課題。分析食品中的黃曲霉素及各種香料,,又是生產(chǎn)中的常用課題,。如今此技術(shù)已在分析咖啡中的黃嘌泠、調(diào)料中的核甙酸及核甙,、果汁中的有機(jī)酸,、米中的維生素、牛奶中的維生素D等都對食品營養(yǎng)價值提供有效數(shù)據(jù),。
環(huán)境分析
主要針對大氣中污染的成分分析,,廢水和汽車尾氣中有害組分的分析。如柴油機(jī)排出的顆粒,,用有機(jī)溶劑溶解后,,經(jīng)色譜分析結(jié)果,有多環(huán)芳烴的硝基物,,這是對人體健康有很大潛在危險的化合物,。又如藥廠排出的廢水中有大量硝酚、斯蒂芬酸,;染料廠排出廢水中的苯胺等,。用液相色譜分析簡便迅速。