半制備色譜是介于分析色譜和制備色譜之間的一種色譜技術(shù),主要用于藥物研究,、有機合成等領(lǐng)域中化合物的分離和純化,。相比于分析色譜,它可以處理更大量級的樣品,,并且可以在較短時間內(nèi)獲得較高純度的化合物。原理與其他色譜技術(shù)相似,,都是利用化合物在固定相和流動相之間的分配系數(shù)不同而實現(xiàn)分離,。通常使用的固定相是多孔硅膠、葡聚糖,、聚苯乙烯等顆粒狀物質(zhì),,流動相則是一種或多種溶劑、緩沖液或鹽溶液,。在色譜中,,使用的填料尺寸通常在10微米至50微米之間,對應(yīng)的柱徑為10毫米至30毫米,。由于填料尺寸較大,,因此其進樣量也比分析色譜大得多。
![](https://img58.chem17.com/c0ee292ce8e115ddee0e6a8b39619f825ddbd69288df1063427b014e24998fbec468d319863abebc.jpg)
半制備色譜的操作步驟通常包括以下幾個步驟:
1.樣品制備:根據(jù)需要,,將需要分離的化合物從原料中提取出來并進行純化,,如溶解、過濾,、洗滌等,。
2.填充柱:將填料放入色譜柱中,并用適當?shù)木彌_液或溶劑進行均勻填充,,以保證填料間隙不會過大或過小,。
3.進樣:將樣品注入進樣器中,通過壓力差讓樣品進入色譜柱頂端,。
4.分離:在流動相的作用下,,化合物被分離并輸出到柱底,,不同化合物輸出時間的差異導致它們被分離。
5.采集:分離后的化合物通過UV檢測器進行檢測,,然后采用收集器進行采集并蒸發(fā),,得到較高純度的化合物。
半制備色譜的應(yīng)用:
1.藥物分離和純化:可以用于藥物分離和純化,,在藥物研究和制造過程中起到了積極的推動作用,。
2.天然產(chǎn)物提取:可以用于天然產(chǎn)物提取,,從天然源中分離出目標化合物并實現(xiàn)純化,。
3.有機合成:可以用于有機合成中,對反應(yīng)產(chǎn)物進行分離和純化,,并實現(xiàn)單一化合物的收集,。
4.研究某些生物學活性大分子:可以用于研究生物學活性大分子的分離和純化,如蛋白質(zhì),、核酸等,。