衍生化是一種利用化學(xué)變換把化合物轉(zhuǎn)化成類似化學(xué)結(jié)構(gòu)的物質(zhì),。一般來說,,一個特定功能的化合物參與衍生反應(yīng),溶解度,,沸點,,熔點,聚集態(tài)或化學(xué)成分會產(chǎn)生偏離,。由此產(chǎn)生的新的化學(xué)性質(zhì)可用于量化或分離,,樣品的衍生化的作用主要是把難于分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為與其化學(xué)結(jié)構(gòu)相似但易于分析的物質(zhì),,便于量化和分離。
衍生一般有兩種,,一種是柱前衍生,,另一種則是柱后衍生,這兩者各有各的特點,,柱前衍生指的是在分析物經(jīng)過色譜柱前與衍生試劑反應(yīng),,反應(yīng)產(chǎn)物在色譜柱上實現(xiàn)分離,實際分離的是衍生產(chǎn)物,,檢測的也是衍生產(chǎn)物,;而柱后衍生指的是分析物在色譜柱中實現(xiàn)分離后,在衍生池內(nèi)與衍生試劑反應(yīng),,檢測的是衍生產(chǎn)物,。
1、柱前衍生的優(yōu)點分析:1)相對自由地選擇反應(yīng)條件,。2)不存在反應(yīng)動力學(xué)的限制,。3)衍生副產(chǎn)物可進行預(yù)處理。4)容易允許多步反應(yīng)的進行,。5)不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備,。6)有較多的衍生劑可選擇。但是柱前衍生所形成的衍生副產(chǎn)物可能對色譜分離造成較大困難,,且在衍生化過程中,,容易引入雜質(zhì),或損失樣品,。
2,、柱后衍生的優(yōu)點分析:1)分析物可以在其原有的形式下進行分離,容易選用已有的分析方法,。2)重現(xiàn)性好,,影響因素少,引入物質(zhì)比較少,。但是柱后衍生對于一定的溶劑和有限的反應(yīng)時間來說,,目前只有有限的反應(yīng)可供選擇,除此之外,,需要額外的儀器設(shè)備,,可能有擴散問題。
當(dāng)試劑與色譜柱流出物混合時,,分析分離完成,。因此,最重要的是分析物盡快反應(yīng)。反應(yīng)時間越長,,則反應(yīng)器所需的體積越大,。體積較大時,峰形將變形,。為了使譜帶擴散小,,重要的是要使色譜柱和檢測器之間的總時間(以及因此的體積)盡可能的短。如果反應(yīng)緩慢(超過一分鐘),,可以使用高溫減少反應(yīng)時間,。