22
讀完這篇文章你就知道半制備色譜究竟是怎么一回事兒了
半制備色譜是指采用色譜技術制備純物質,，即分離、收集一種或多種色譜純物質,。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物,，以滿足研究和其它用途。半制備色譜的出現(xiàn),，使色譜技術與經(jīng)濟利益建立了,。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個重要指標。其中,，半制備色譜主要用于石油化工產品和揮發(fā)性天然產物的色譜純樣品制備,。
半制備色譜到底是什么？
1,、分析色譜的目的,，是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的,，是從混合物中得到純物質,。為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進樣品量很大,，導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大,，也就必須加譜柱填料，增大制備色譜的直徑和長度,，使用的相對多的流動相,。
然而，當色譜柱上樣品負載加大的時候,，往往導致柱效急劇下降而得不到純的產品,。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾,，對重現(xiàn)性也要考慮,。從經(jīng)濟上來說,。制備色譜要爭取少用填料，少用溶劑,，要盡可能多的得到產品,。
2、樣品的前處理,，制備色譜柱子由于處理的樣品多,，比分析柱子更容易受污染，所以,，必要的前處理就顯得非常的必要,。萃取、過濾,、結晶,、固相萃取等簡單的分離方法，如果用得上,，而且還不是很麻煩,，就要盡可能多的采用以去掉雜質。
3,、固定相的選擇,，硅膠、鍵合固定相,、離子交換樹脂,、聚酰胺、氧化鋁,、凝膠等都可以作為色譜柱的填料,。有不少文獻報道，對填料可以進行一下處理提高了分離效果,，如,，對硅膠進行的硝酸銀處理。
4,、裝柱方法的選擇根據(jù)固定相顆粒度和柱子的尺寸,，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好,。裝柱效果跟填料的顆粒度關系很大,，顆粒度的減少會導致裝柱的難度。一般來說,，顆粒直徑小于20-30um的固定相采用濕法裝填,。所謂“敲擊-裝填”技術適用于顆粒直徑大于25um的固定相。濕法的目的是迫使相對稀松的固定相懸漿以高速裝入色譜柱子,，從而減少空隙的形成,。然而,，當柱直徑大于20mm，所加壓力為30-40bar時,，高壓懸漿裝填技術就變得十分復雜。為將小顆粒固定相裝入更大得制備型色譜柱,，可采用柱長壓縮技術,。這種方法，先將固定相懸漿裝入柱中加壓,，利用物理方法將其壓緊,。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設備,，在柱子填完后,，應用有柱效的測量，對柱效低的柱子應該重填,。
除了和分析色譜同樣的考慮外,，在選用流動相時，要考慮色譜分離后面加有旋轉蒸發(fā)等二次分離操作,。一般來說,，不宜采用高毒性溶劑，對多元溶劑要盡可能的少用,。
分析譜圖的峰形狀,，對確定保留時間也有很大的參考價值。手工餾分收集費時費力,，自動餾分收集器有很大的方便,。許多實驗室和工廠都采用了餾分收集器。在制備色譜中,，因為沒有必要達到分析色譜那樣的分離度,，可以在一定范圍內大大加大進樣的濃度和體積。在做分離的時候,，也有一些分析色譜的時候,，不能用到的技巧。因為篇幅關系,，不在這里敘述,。通過接頭或者閥門，實現(xiàn)柱子的簡單延長,，或者比較方便地實現(xiàn)對其中一個(或幾個)組分的精制,。
半制備色譜可以連續(xù)進樣，并可以利用邊緣切割效用,，而且采用了柱切換技術,，能更好的利用溶劑和填料,，已經(jīng)應用于工業(yè)化生產。其理論和技術也日益完善,。迎頭色譜,、超臨界流體色譜、逆流色譜環(huán)形色譜,、氣相半制備色譜等在科研和工業(yè)生產中也得到了應用,。