檢測器的作用是將色譜柱流岀物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號,。液相色譜檢測器共有6種，檢測不同的物質(zhì)選擇不同的檢測器,，
 

　　今天,，拉姆研發(fā)就和小伙伴一起看看各種檢測的原理及選擇方法。‍
 

　　1,、紫外可見吸收檢測器
 

　　紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visibledetector,，UVD)是HPLC中應(yīng)用廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器,。其特點是靈敏度較高,，線性范圍寬，噪聲低,，適用于梯度洗脫,，對強吸收物質(zhì)檢測限可達(dá)1ng，檢測后不破壞樣品,，可用于制備,，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似,，實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計,。
 

　　(1)紫外吸收檢測器
 

　　紫外吸收檢測器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長,，并安裝一個光柵型單色器,，其波長選擇范圍寬(190nm～800nm)。它有兩個流通池,，一個作參比,，一個作測量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上,，若兩流通池都通過純的均勻溶劑,，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強度相等,，無信號輸出,。當(dāng)組分進(jìn)入測量池時，吸收一定的紫外光,，使兩光電管接受到的輻射強度不等,，這時有信號輸出,，輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
 

　　局限：流動相的選擇受到一定限制,，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相,，每種溶劑都有截止波長，當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,，溶劑的透光率降至10%以下,，因此，紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長,。
 

　　(2)光電二極管陣列檢測器(photodiodearraydetector,，PDAD)
 

　　也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器,。它采用光電二極管陣列作為檢測元件,，構(gòu)成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光,，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號,，然后對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖,。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù),，從而迅速決定具有選擇性和靈敏度的波長。
 

　　單光束二極管陣列檢測器,，光源發(fā)出的光先通過檢測池,，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上,，使所有波長的光在接收器上同時被檢測,。陣列式接收器上的光信號用電子學(xué)的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms,，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過色譜流出峰的速度,，因此可隨峰掃描。‍
 

　　2,、熒光檢測器
 

　　熒光檢測器(fluorescencedetector,，F(xiàn)D)是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物,。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進(jìn)行熒光檢測,。其小檢測濃度可達(dá)0.1ng/ml,，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級,，但其線性范圍不如紫外檢測器寬,。
 

　　近年來,，采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器地增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度,，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。
 

　　3,、蒸發(fā)光散射檢測器
 

　　蒸發(fā)光散射檢測器(EvaporativeLight-scatteringDetector,ELSD),，能檢測不含發(fā)色團的化合物，如：碳水化合物,、脂類,、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸,、表面活性劑,、藥物(人參皂苷、黃芪甲苷),，并在沒有標(biāo)準(zhǔn)品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測未知化合物,。
 

　　蒸發(fā)光散射檢測器的*檢測原理為，首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠,，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā),，后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。
 

　　1,、霧化：
 

　　液體流動相在載氣壓力的作用下在霧化室內(nèi)轉(zhuǎn)變成細(xì)小的液滴,，從而使溶劑更易于蒸發(fā)。液滴的大小和均勻性是保證檢測器的靈敏度和重復(fù)性的重要因素,。蒸發(fā)光散射檢測器,，通過對氣壓和溫度的準(zhǔn)確控制，確保在霧化室內(nèi)形成一個較窄的液滴尺寸分布,，使液滴蒸發(fā)所需要的溫度大大降低,。
 

　　2、蒸發(fā)：
 

　　載氣把液滴從霧化室運送到漂移管進(jìn)行蒸發(fā),。在漂移管中,，溶劑被除去，留下微?；蚣?nèi)苜|(zhì)的小滴,。蒸發(fā)光散射檢測器采用低溫蒸發(fā)模式，維持了顆粒的均勻性,，對半揮發(fā)性物質(zhì)和熱敏性化合物同樣具有較好的靈敏度,。
 

　　3、檢測：
 

　　光源采用激光,，溶質(zhì)顆粒從漂移管出來后進(jìn)入光檢測池,，并穿過激光光束,。被溶質(zhì)顆粒散射的光通過光電倍增管進(jìn)行收集。溶質(zhì)顆粒在進(jìn)入光檢測池時被輔助載氣所包封,，避免溶質(zhì)在檢測池內(nèi)的分散和沉淀在壁上,，增強了檢測靈敏度并地降低了檢測池表面的污染。
 

　　不同于紫外和熒光檢測器,，ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性,，任何揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測，不受其官能團的影響,。敏度比示差折光檢測器高,，對溫度變化不敏感，基線穩(wěn)定,，適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用,。
 

　　4、電化學(xué)檢測器
 

　　電化學(xué)檢測器(electrochemicaldetector,，ED)主要有安培,、極譜、庫侖,、電位,、電導(dǎo)等檢測器，屬選擇性檢測器,，可檢測具有電活性的化合物,。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物組織和體液的代謝物,、食品添加劑,、環(huán)境污染物、生化制品,、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測定中獲得了廣泛的應(yīng)用,。其中，電導(dǎo)檢測器在離子色譜中應(yīng)用多,。
 

　　電化學(xué)檢測器的優(yōu)點是：
 

　?、凫`敏度高，小檢測量～般為ng級,，有目可達(dá)pg級,；
 

　　②選擇性好,，可測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì),；
 

　　③線性范圍寬，一般為4～5個數(shù)量級,；
 

　?、茉O(shè)備簡單，成本較低,；
 

　?、菀子谧詣硬僮鳌?zwj;
 

　　5,、示差折光檢測器
 

　　示差折光檢測器(differentialrefractiveIndexdetector,，RID)是一種濃度型通用檢測器，對所有溶質(zhì)都有響應(yīng),，某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物,、糖類,、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測,。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的,。
 

　　光從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時，由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會產(chǎn)生折射,。只要樣品組分與流動相的折光指數(shù)不同,，就可被檢測，二者相差愈大,，靈敏度愈高,，在一定濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。‍
 

　　06,、化學(xué)發(fā)光檢測器
 

　　化學(xué)發(fā)光檢測器(Chemiluminescencedetector,，CD)是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,，因其設(shè)備簡單,、價廉、線性范圍寬等優(yōu)點,。其原理是基于某些物質(zhì)在常溫下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),，生成處于激發(fā)態(tài)勢反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)物，當(dāng)它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時,，就發(fā)射出光子,。由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來自化學(xué)反應(yīng)，故叫作化學(xué)發(fā)光,。當(dāng)分離組分從色譜柱中洗脫出來后,，立即與適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合，引起化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射,，其光強度與該物質(zhì)的濃度成正比,。
 

　　這種檢測器不需要光源，也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng),，只要有恒流泵,，將化學(xué)發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,，通過光電倍增管將光信號變成電信號,，就可進(jìn)行檢測。這種檢測器的小檢出量可達(dá)10-12g,。‍