1,、純度,。流動(dòng)相必須用HPLC級(jí)的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)（使用0.45um或更細(xì)的膜過濾）,。溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累,，會(huì)影響色譜柱的使用壽命。

 

　　2,、溶解度,。樣品的溶解度要適宜如果溶解度，如果溶解度欠佳樣品會(huì)在柱頭沉淀,，不但影響純化分離,，還會(huì)縮短柱子的使用壽命。

 

　　3,、粘度,。 要低（應(yīng)<2cp） 高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),，降低柱效,，還會(huì)使柱壓降增加，使分離時(shí)間延長(zhǎng),。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動(dòng)相,。

 

　　4、樣品易于回收,。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑,。

 

　　5、流動(dòng)相,。PH 采用反相色譜法分離弱酸（3≤pKa≤7）或弱堿（7≤pKa≤8）樣品時(shí),，通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值，以抑制樣品組分的解離,，增加組分在固定相上的保留,，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對(duì)于弱酸,，流動(dòng)相的pH值越小，組分的k值越大,，當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時(shí),，弱酸主要以分子形式存在,；對(duì)弱堿，情況相反,。分析弱酸樣品時(shí),，通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液,；分析弱堿樣品時(shí),，通常在流動(dòng)相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液,。

 

　　色譜泵的使用與維護(hù)

 

　　為了延長(zhǎng)泵的使用壽命和維持其輸液的穩(wěn)定性,，必須按照下列注意事項(xiàng)進(jìn)行操作：

 

　　1、防止任何固體微粒進(jìn)入泵體,，因?yàn)閴m?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán),、缸體和單向閥,，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相在玻璃容器內(nèi)蒸餾,，而常用的方法是濾過,，可采用Millipore濾膜（0.2?m或0.45?m）等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒（或片）,。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換,。

 

　　2.泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完，否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞,、缸體或密封環(huán),，產(chǎn)生漏液。

 

　　3.輸液泵的工作壓力決不要超過規(guī)定的高壓力,，否則會(huì)使高壓密封環(huán)變形,，產(chǎn)生漏液。

 

　　色譜泵的使用與維護(hù)

 

　　在日常分離分析工作中,，色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,，色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響色譜柱的壽命,，在色譜操作過程中,，需要注意下列問題，以維護(hù)色譜柱,。

 

　　1,、柱子在裝卸、更換時(shí),，動(dòng)作要輕,，接頭擰緊要適度,。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng)，以免柱床產(chǎn)生空隙,。

 

　　2,、如果儀器用來(lái)做常規(guī)分析，樣品種類有限,，但分析次數(shù)多,，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根柱，這樣有助于延長(zhǎng)柱子的壽命,。

 

　　3,、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩,。

 

　　4,、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/div>