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液相色譜峰分叉了,,怎么辦,?
做液相色譜的同學(xué)基本都會(huì)碰到分叉峰,很多時(shí)候,,這都意味著硬件或者方法某些地方可能出現(xiàn)問題,。今天我們就一起看看導(dǎo)致峰分叉的原因,以及如何解決這個(gè)問題,。
首先,,我們需要判斷這到底是一個(gè)峰,還是兩個(gè)峰?
A圖主峰前面有一個(gè)肩峰
這到底是峰形不好,,還是另外一個(gè)化合物沒分開呢?
判斷方法:降低該成分在樣品中的濃度
B圖是降低該成分濃度后進(jìn)樣后得到的色譜圖,,如果這是一個(gè)峰那肩峰也應(yīng)該響應(yīng)變小,但是這個(gè)例子里,,肩峰沒有變小這應(yīng)該是另外一個(gè)化合物,。這時(shí)候,我們就要考慮如何改變方法,,將這兩個(gè)東西分開,。
如果所有峰的峰形都不好
一般來說,一個(gè)樣品都會(huì)出多個(gè)峰,,絕大多數(shù)時(shí)候在每個(gè)峰上面都出現(xiàn)肩峰比如像下面這樣:
這種情況一般都是管路連接,、液相色譜柱頭塌陷或者柱頭的篩板被堵導(dǎo)致的。
如何解決液相色譜柱頭篩板被堵的問題呢,?
01反沖
柱出口放空,,沖20-30ml流動(dòng)相。雖然液相色譜柱上都有表明使用方向,,但是對(duì)于硅膠基質(zhì)的色譜柱基本都可以反沖,。
將柱頭污染物如泵密封圈的碎屑,樣品中的污染等沖走,,就能解決問題,。
02更換或清洗篩板
現(xiàn)在估計(jì)做這個(gè)事情的人不多,但是如果有廢的液相色譜柱,,想練練也未嘗不可,。將篩板取下來,用超聲波清洗器清洗,,晾干后安裝,;如果清洗后依然沒有效果則需要更換新的篩板,。
當(dāng)然,還是要提倡大家注意樣品上機(jī)之前的前處理和及時(shí)更換磨損的泵密封圈,。有條件的還是用保護(hù)柱,,大不了就換保護(hù)柱,也比換色譜柱成本更低,。