1. 快速色譜

  柱壓通常為2bar（或30psi）左右，對于那些容易分離的簡單混合物,，由于快速色譜具有操作簡便,、經(jīng)濟等優(yōu)點,，常常是實驗室的。但快速色譜不同于一般的層析分離,，這種分離沒有壓力,，而快速分離通常使用瓶裝氮氣加壓，使流動相具有一定的流速,，從而縮短了分離時間。

  快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱,，柱直徑為3～10cm．長度為7～15cm,。快速色譜中使用zui廣泛的固定相為硅膠,。采用的粒徑通常為： 25～40μm,，40～63μm或63～200μm的球形固定相,。其它如鍵合相,、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用,。
 

2. 低壓色譜（LPLC）

    柱壓一般低于5bar（或75psi）,。

    低壓色譜一般是由蠕動泵,、進樣閥和檢測器組成，可以連續(xù)化,，實現(xiàn)自動的梯度淋洗和餾分收集等操作,。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的,，長度一般為240-440mm,，內(nèi)徑為10-40mm,。

    對于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì),，光學檢測器很常用,。填料一般使用軟質(zhì)的葡聚糖,、瓊脂糖、纖維素,、合成高聚物或離子交換劑，粒徑一般為40-60μm,。
 

3. 中壓液相色譜（MPLC）

    柱壓在5-20bar（或75-300psi）之間,，廣泛用于實驗室和工業(yè)規(guī)模的生物制品(如動物臟器提取液、濃縮液,、體液,、植物提取液,、生物技術(shù)發(fā)酵液等。往往需要經(jīng)過濾膜作初級凈化的處理,，以提取或純化所需的產(chǎn)品。

中壓液相制備色譜的主要部件為輸液泵,、進樣閥,、檢測器、餾分收集器等,，比如瑞士公司的早期的中壓液相制備色譜，其輸液泵zui大流速可達156mL/min,，并配有阻尼器,，以保證液流的穩(wěn)定；進樣器配有0.5-50mL的不同體積的定量管,；檢測器有紫外和示差折光檢測器,，流通池體積比較大，允許大流量流動相通過而無需分流,；餾分收集器有原盤式和排式兩種,，圓盤式的接收管zui多達80個，而排式的則更多,；色譜柱內(nèi)徑10-105mm,，長度250-1760mm不等。

對于一般中壓制備色譜,，當色譜柱直徑較大時，柱頭往往設計成錐形或有類似于傘狀的液流導向結(jié)構(gòu),，使得當大量樣品進入到柱頭上時,，能迅速地分散到整個柱橫截面上，及時被流動相沖走,，避免了因樣品的局部過濃而引起柱超負荷和譜帶加寬,。柱子填料則采用比較耐壓的交聯(lián)改性的多糖凝膠(如Sepharose CL，Superose等),，聚合物微球,，復合材料介質(zhì)或硬質(zhì)SiO2基質(zhì)的化學鍵合相等,，粒徑一般在25～40μm（zui常用的填料尺寸是15-25μm，25-40μm或40-63μm）,，可采用濕法或干法裝柱,。
 

4. 高壓液相色譜(HPLC)

    這是指柱壓一般大于20bar（或300psi）的“高壓(或)液相色譜”，通常指所用色譜柱的塔板數(shù)大于2000,，一般是在2000～20000的范圍之間,。

    當需要從大量的物質(zhì)中分離純化不足1％的所需成分時，分離工作將會十分困難,，往往在純化的zui后階段需要使用10μm或更小顆粒的填料,。為獲得所需微量組分，可采用如下分離手段：制備型分離→半制備型分離→分析型分離→產(chǎn)物,。為提高每次分離獲得純品的數(shù)量,，制備型高壓液相色譜分離通常在超載情況下運行。

    高壓液相色譜,，即目前常用的液相色譜,。色譜柱內(nèi)填裝的是粒度范圍較窄的微小顆粒固定相(3～30μm)，為使流動相流出,，需采用較高的壓力,，同時系統(tǒng)的復雜性及成本亦增大，但分辨率可得到較大的提高,。而填裝較大顆粒的固定相時,，如中壓液相色譜系統(tǒng)，裝柱較容易,，柱的通透性較高(只需較低的泵壓力),，可采用更大的色譜柱和更經(jīng)濟的儀器，由此分辨率也較低,。
 

5. 用分析型高壓液相色譜進行制備型分離

    當所需純化合物的量很少時(微克級至幾毫克),，可用分析型色譜柱進行多次分離。效果和利用大直徑色譜柱進行一次性分離相同,。采用小直徑色譜柱時,，可利用已有的分析型儀器，而無需在色譜柱,、填料及附件方面投入更大資金,。另外,，還可在很大程度上避免由于放大所產(chǎn)生的問題,，使分離速度加快。

    小直徑色譜柱的尺寸一般為250×4.6mm,，每次可進樣5～100ug,，通過多次進樣分離,，可獲得足夠的純品。例如,，Suzuki等(1994)報道從豆科植物羽扇豆(Lupinus

Hirsutus)中分離一羽扇豆生物堿糖苷時,，其zui后的分離步驟采用LiChrosorb Si60，5μm,，250×4.6mm色譜柱進行高壓液相色譜分離,，洗脫劑為含25％甲醇的yi醚溶液－5％氨水50:1。經(jīng)常需用分析型色譜柱進行分離的一個領(lǐng)域是對肽類化合物的純化,。

    為了提高分離效率,，可將高壓液相色譜柱連接起來使用。此時可采用顆粒度在20～30μm的填料,，以保持適當?shù)耐ㄍ感?，尤其是當使用含水溶劑時。當使用己烷等有機溶劑時,，由于流動相的粘度較低,，可使用顆粒度為10 μm的填料。