液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器,、泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成,。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi),,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),,在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
液相色譜儀有“四高一廣”的特點(diǎn):
1,、高壓:流動(dòng)相為液體,,流經(jīng)色譜柱時(shí),受到的阻力較大,,為了能迅速通過(guò)色譜柱,,必須對(duì)載液加高壓。
2,、高速:分析速度快,、載液流速快,,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個(gè)樣品在15~30分鐘,,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,,一般小于1小時(shí)。
3,、:分離效能高,。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到*分離效果,,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍,。
4、高靈敏度:紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng,,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí),。
5、應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用液相色譜分析,,特別是高沸點(diǎn),、大分子、強(qiáng)極性,、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,,顯示出優(yōu)勢(shì)。
6,、柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物
7,、樣品量少、容易回收:樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞,,可以收集單一組分或做制備。
液相色譜儀是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法,,液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶,、輸液泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測(cè)器和記錄器組成,其整體組成類(lèi)似于氣相色譜,,但是針對(duì)其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整,。液相色譜儀要求輸液量恒定平穩(wěn);進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密,;由于液體流動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長(zhǎng)度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱,。液相色譜儀應(yīng)用非常廣泛,,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域,。
使用液相色譜儀時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),,由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),,zui后通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。液相色譜儀作為一種重要的分析方法,,廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中,。液相色譜儀從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵,、高靈敏度檢測(cè)器和微粒固定相,,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大,、不同極性的有機(jī)化合物,。