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液相常用檢測(cè)器的種類有哪些
HPLC中常用的檢測(cè)器分有如下幾種,,紫外吸收檢測(cè)器(UVD),、二極管陣列檢測(cè)器(PDAD)、熒光檢測(cè)器(FLD),、示差折光檢測(cè)器(RID),、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)、質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD)等,。
選擇性檢測(cè)器
1,、紫外吸收檢測(cè)器(UVD)是目前HPLC中應(yīng)用zui廣泛的檢測(cè)器。它的主要特點(diǎn)是靈敏度高,,線性范圍寬,,對(duì)流速和溫度變化不敏感,,可用于梯度洗脫。它要求被檢測(cè)樣品組分有紫外吸收,,屬于選擇性檢測(cè)器,。
2、二極管陣列檢測(cè)器(PDAD)是20世紀(jì)80年代才出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道檢測(cè)器,,它可以看作是UVD的一個(gè)分支,。在對(duì)每個(gè)洗脫組分進(jìn)行光譜掃描,經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后,,得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜,。其中吸收光譜用于定性(確證是否是單一純物質(zhì)),色譜用于定量,,常用于復(fù)雜樣品(如生物樣品,、中草藥)的定性定量分析。
3,、熒光檢測(cè)器(FLD)同樣屬于選擇性檢測(cè)器,,其靈敏度在目前常用的HPLC檢測(cè)器中是zui高的,應(yīng)用也較多,,僅次于UVD,。它適用于能激發(fā)熒光的化合物。很多與生命科學(xué)有關(guān)的物質(zhì),,如氨基酸,、胺類、維生素,、甾族化合物及某些代謝藥物都可以用熒光法檢測(cè),。熒光檢測(cè)器在生物樣品痕量分析中很有用,尤其在用熒光衍生后,,可以檢測(cè)很微量的氨基酸和肽,。
通用型檢測(cè)器
1、示差折光檢測(cè)器(RID)是一種通用型檢測(cè)器,,只要被測(cè)組分與洗脫液的折光指數(shù)有差別就可使用,。生命科學(xué)中常遇到各類糖類化合物,沒有紫外吸收,,一般常用示差折光檢測(cè)器。它的通用性比UVD廣,,但靈敏度要低,,對(duì)溫度變化敏感,并與梯度洗脫不相容,,因而限制了它的使用,。
2,、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)也是一種通用型的檢測(cè)器,可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品,,而不需要樣品含有發(fā)色基團(tuán),。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比,因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢測(cè)未知物,。ELSD靈敏度比RID高,,對(duì)溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,,可用于梯度洗脫?,F(xiàn)在ELSD已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂,、脂肪酸和氨基酸,、藥物以及聚合物等的檢測(cè)。
3,、質(zhì)譜檢測(cè)器(MSD)是另一種通用型檢測(cè)器,,在靈敏度、選擇性,、通用性及化合物的分子量和結(jié)構(gòu)信息的提供等方面都有突出的優(yōu)點(diǎn),。但它的昂貴操作費(fèi)用和復(fù)雜性限制了它的推廣應(yīng)用。