乳鐵蛋白是近幾年開(kāi)發(fā)研究速度最快的營(yíng)養(yǎng)添加劑之一，不僅具有廣譜抗菌,，抗病毒感染作用,，還能調(diào)節(jié)體內(nèi)鐵平衡、調(diào)解骨髓細(xì)胞的生成等,。乳鐵蛋白在國(guó)內(nèi)外食品加工中的應(yīng)用日益廣泛,，故有關(guān)乳鐵蛋白的安全生產(chǎn)和使用是需要重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題。
安譜實(shí)驗(yàn)根據(jù)《GB 5009.299-2024 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乳鐵蛋白的測(cè)定》,，使用 Poly-Sery 肝素親和柱（SBEQ-CC65001）對(duì)牛奶和奶粉進(jìn)行樣品凈化結(jié)合高效液相色譜（Athena C4 液相色譜柱,，LAEQ-461579）測(cè)定乳鐵蛋白,。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 PolySery 肝素親和柱回收率高，性能穩(wěn)定,，在保證高回收率的同時(shí)流速適中,，可以顯著節(jié)約工時(shí)和操作時(shí)間。
產(chǎn)品特點(diǎn)
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1,、性能優(yōu)異：柱容量和回收率滿(mǎn)足標(biāo)準(zhǔn)要求,，性能穩(wěn)定，平行性?xún)?yōu)異,；
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2,、流速適中：CNW 小柱流速與市面上現(xiàn)有品牌小柱相比，快 1~1.5 倍,，在保證回收率效果的同時(shí),，能夠節(jié)約工時(shí)和操作時(shí)間，節(jié)省人力物力,；
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3,、適用范圍廣：適用于牛奶、奶粉類(lèi)等基質(zhì),，同時(shí)適用于GB 5009.299-2024與NY-T 4439-2023標(biāo)準(zhǔn)方法,，能夠滿(mǎn)足不同檢測(cè)的需要。
一,、樣品前處理
溶液配置：
u磷酸鹽緩沖液Ⅰ（洗脫液）：
將磷酸鹽緩沖包Ⅰ450 mL 純水溶解,，用10 M 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至 7.5±0.2，定容至 500 mL,，轉(zhuǎn)移至潔凈密封的試劑瓶中,。
磷酸鹽緩沖液Ⅱ（提取液）：
將磷酸鹽緩沖包Ⅱ用 900mL 純水溶解，用磷酸溶液調(diào)節(jié) pH 至 7.5 ± 0.2,，定容至1L,，轉(zhuǎn)移至潔凈密封的試劑瓶中。
樣品提?。?/strong>
牛奶：
稱(chēng)取 5g 試樣于燒杯中,，加標(biāo)后，加入適量磷酸鹽緩沖液Ⅱ提取,，分次將樣品轉(zhuǎn)移至 25 mL 容量瓶,，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ 定容至刻度，充分混勻后轉(zhuǎn)入離心管 5000 r/min 離心 15 min,，取樣液待凈化,。
嬰兒配方奶粉：
稱(chēng)取 5g 試樣于燒杯中，加標(biāo)后,，加入溫?zé)?( 溫度不超過(guò) 50 ℃ ) 的磷酸鹽緩沖液 Ⅱ,，攪 拌使樣品溶解,，冷卻至室溫，分次將樣品轉(zhuǎn)移至 50 mL 離心管中并用磷酸鹽緩沖液 Ⅱ 定容至刻度,，充分混勻后轉(zhuǎn)入離心管中,，取 40 mL 溶液在室溫條件下 5000 r/min 離心 15 min，取樣液待凈化,。
柱容量驗(yàn)收：
上樣加標(biāo) 2 mg,。
SPE 小柱操作：
肝素親和柱（SBEQ-CC65001，6 mL/30 pcs）
活化：5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ,；
上樣：10 mL 上清液（1 d/2 s）,；
淋洗：10 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ，排干,；
洗脫：4.5 mL 磷酸鹽緩沖液Ⅰ,，排干，收集全部洗脫液,。磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至 5 mL 混合,，過(guò) 0.22 μm 濾器后，進(jìn)樣,，待HPLC/UV 檢測(cè),。
注意事項(xiàng)：
①上樣要注意控制流速，流速過(guò)快可能造成10%-15% 左右損失,；
② 進(jìn)樣前的針式濾器,，推薦采用親水PVDF濾器、親水PTFE濾器及水相聚醚砜針式濾器進(jìn)行過(guò)濾,，不推薦尼龍針式濾器,，可能造成40%-60%的損失。
二,、儀器條件
液相色譜：ACQUITY UPLC超高效液相色譜儀
a) 色譜柱：Athena C4液相色譜柱（LAEQ-461579,，4.6*150 mm, 5 μm, 300 A, 含柱效液）；
b) 流速：1.0 mL/min
c) 流動(dòng)相：0.1%三_氟_乙_酸,，乙腈梯度洗脫,，詳情見(jiàn)下表。
表 1-1 梯度洗脫表
三,、實(shí)驗(yàn)譜圖
圖 1-1 100 ppb 標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖
圖 1-2 牛奶樣品加標(biāo)譜圖
圖 1-3 嬰兒配方奶粉樣品加標(biāo)譜圖
四,、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
表 1-2 水樣加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)
五,、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
參照GB 5009.299-2024使用Poly-Sery 肝素親和柱進(jìn)行柱容量驗(yàn)證及牛奶基質(zhì),、嬰兒配方奶粉基質(zhì)乳鐵蛋白加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，可以看出,，肝素親和柱的柱容量回收率超過(guò) 95%,，且嬰配奶粉基質(zhì)回收率高于其他國(guó)產(chǎn)品牌,， RSD 值小于 5%，平行性?xún)?yōu)異,，柱容量滿(mǎn)足國(guó)標(biāo)要求,。說(shuō)明 CNW 小柱具有優(yōu)異的性能。
六,、產(chǎn)品推薦
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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