在色譜分析檢測中（GC&HPLC）,，我們經(jīng)常要使用到衍生化技術(shù)手段來達到對目標物質(zhì)的定性定量分析，按照衍生化發(fā)生在色譜分析前后,，分為柱前衍生和柱后衍生,，今天我們就和小編一起學習衍生化目的,、原理、分類和應用等,。
衍生化包括分析物與衍生化試劑之間發(fā)生的化學反應，其目的是改變該分析物的理化性質(zhì),，主要有以下幾個目的：
?提高檢測性能
?改變分析物的分子結(jié)構(gòu)或極性以獲得更出色的色譜分離
?增加揮發(fā)性
?改變基質(zhì)性質(zhì)以實現(xiàn)更好的分離
?穩(wěn)定分析物
•硅烷基指*基硅烷Si(CH3)3或稱TMS；
•硅烷化作用是指將硅烷基引入到分子中,，一般是取代活性氫,；
•活性氫被硅烷基取代后降低了化合物的極性，增強了揮發(fā)性和穩(wěn)定性,；
•對于不揮發(fā)或者200-300℃的穩(wěn)定性,，可以使用硅烷化試劑衍生；
•硅烷化試劑容易吸潮失效,，因此在使用過程中需要對樣品和試劑脫水,。
•?；芙档土u基,、氨基、巰基的極性,，減小色譜峰拖尾,，增強揮發(fā)性；
•能增強某些容易氧化的化合物（如：兒茶酚胺）的穩(wěn)定性,；
•引入含有鹵離子的?；梢蕴岣唠娮硬东@檢測器（ECD）的靈敏度,。
紫外衍生化試劑主要是給一些沒有紫外吸收或者紫外吸收很弱的化合物分子引入強紫外吸收的基團,，使得目標物能被紫外檢測器檢測。
液相色譜檢測中熒光檢測器的靈敏度要比紫外檢測的靈敏度高出幾個數(shù)量級,，但是大多數(shù)化合物沒有熒光,，通過熒光衍生化試劑將目標物上接上能發(fā)出熒光的生色基團，以達到熒光檢測的目的,，由于熒光衍生物的激發(fā)波長與發(fā)射波長與衍生化試劑不同,，即使衍生化試劑過量或者有副反應，也不干擾熒光衍生物的檢測,。
電化學檢測器（ECD）是根據(jù)電化學原理和物質(zhì)的電化學性質(zhì)進行檢測的,，在液相色譜中常用來檢測無紫外和無熒光的，但是有電活性的化合物,，其檢測靈敏度高,，選擇性強,，對于沒有電活性的化合物，與電化學衍生試劑反應,，生成具有電化學活性的衍生物就可以使用ECD檢測,，由于硝基具有電化學活性，因此常用來作為電化學衍生試劑,，常見電化學衍生試劑化如下：
HPLC中的應用案例-氨基甲酸酯農(nóng)藥檢測（GB23200.112-2018）
甲奈威和克百wei屬于氨基甲酸酯一類的廣譜殺蟲劑，常用于水稻和玉米作物,，其本身無熒光,，通過高溫堿性條件下，將其水解為甲基胺,，再與鄰苯二甲醛(OPA) 和2-巰基yi醇(RSH) 反應,，生成具有強熒光性的異吲哚衍生物，可用于熒光檢測,，檢測級別可到達ppt級別,。
GB23200.112-2018中9種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝物的柱后衍生譜圖
GC中的應用案例-氯丙醇及其脂肪酸脂的檢測（GB5009.191-2016）：
酰基化能降低羥基,、氨基,、巰基的極性，改善這些化合物的色譜性能（減少峰拖尾）,，并能提高這些化合物的揮發(fā)性,，也能增強某些容易氧化的化合物的穩(wěn)定性,，當?；瘯r引入了含有鹵素離子的酰基時,，還能提高使用ECD檢測的靈敏度,。
GBGB5009.191-2016中，采用七氟丁酰咪唑作為衍生化試劑,，在溫和的條件下將羥基鈍化反應生成具較好穩(wěn)定性,、良好揮發(fā)性和強電負性的衍生物，并使用GCMS檢測,。
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