薄層色譜TLC通常指以吸附劑為固定相的一種液相色譜法。即將固定相在玻璃,、金屬或塑料等光潔的表面上均勻地鋪成薄層,，試樣點在薄層的一端，流動相借毛細作用流經固定相,使被分離的物質展開,。是吸附色譜,，展開過程中，組分在兩相之間發(fā)生多次吸附-解吸附平衡,，吸附牢的組分隨展開劑移動慢,，吸附弱的組分隨展開劑移動快，一段時間后,，組分被分離,，各組分在薄層板上形成不同距離的斑點。
薄層色譜TLC的操作有這幾個關鍵點：
1,、點樣
盡量用小的點樣管,。如果有足夠的耐性，應該只用1微升的點樣管,。這樣,，點的斑點較小，展開的色譜圖分離度好,，顏色分明,。樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大,，點樣斑點擴散大,。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇,、甲醇、乙酸乙酯,。點好樣的薄層板用電吹風的熱風吹干或放入干燥器里晾干,。
2、鋪板
鋪板用的勻漿不宜過稠或過?。哼^稠,，板容易出現拖動或停頓造成的層紋；過稀,，水蒸發(fā)后,，板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1：2～3,，硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2,。研磨勻漿的時間，根據經驗來定,，與空氣濕度有關,，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴,。勻漿的稀稠除影響板的平滑外,，也影響板涂層的厚度，進一步影響上樣量,。涂層薄,，點樣易過載；涂層厚,，顯色不那么明顯,。通常，板的質量對薄層鑒別的影響不是很大,，影響較大的是展開劑的配制和展開系統(tǒng)的飽和,。
3、展開劑配制
選擇合適的量器把各組成溶劑移入分液漏斗,，強烈振搖使混合液充分混勻,，放置，如果分層,，取用體積大的一層作為展開劑,。不應該把各組成溶液倒入展開缸，振搖展開缸來配制展開劑,?；旌喜痪鶆蚝蜎]有分液的展開劑，會造成層析的*失敗,。各組成溶劑的比例準確度對不同的分析任務有不同的要求,，盡量達到實驗室儀器的較高準確度,，比如：取1ml的溶劑，應使用1ml的單標移液管,，移液管應符合計量認證要求,，盡管多數時候這不是須的。
4,、溫濕度的控制
溫濕度對薄層影響都很大,。不凍結的前提下，通常溫度越低分離越好,，較難的分離需在低溫下分離,，例如人參皂苷。濕度的影響,，估計主要是影響薄層板的吸附能力,，導致選擇性（容量因子）的變化，濕度應根據實際情況確定,。溫度控制使用空調器或冰柜,，濕度控制是通過在另一展開槽放置相應濃度的硫酸,。
5,、展開系統(tǒng)的飽和
一般使用的是雙槽的展開缸，一槽用來放展開劑,，另一槽可加入氨水或硫酸,。把待展開的板放入兩槽間的平臺，斜架著,，蓋上展開缸的蓋子,。讓展開劑的蒸氣充滿展開缸，并使薄層板吸附蒸氣達到飽和,，防止邊沿效應,，飽和時間在半個小時左右。展開時難免要打開蓋子把薄層板放入展開劑中,，不過對薄層板與蒸氣的吸附平衡影響不大,，當然動作應該盡量輕、快,。
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