薄層色譜TLC通常指以吸附劑為固定相的一種液相色譜法。即將固定相在玻璃,、金屬或塑料等光潔的表面上均勻地鋪成薄層,,試樣點(diǎn)在薄層的一端,流動相借毛細(xì)作用流經(jīng)固定相,使被分離的物質(zhì)展開,。
薄層色譜TLC的常規(guī)使用步驟如下:
1.將薄層色譜TLC板切成方形,。良好的尺寸是7厘米x 7厘米,但請確保它首先適合您的溶劑容器,。
2.將用于色譜柱的溶劑倒入玻璃容器中,。溶劑應(yīng)該是2-3毫米深,,這樣斑點(diǎn)不會浸沒,確保了樣品不會溶解到溶劑中并隨著溶劑向上移動到TLC板上,。
3.使用毛細(xì)管將樣品“點(diǎn)”到左下角的板上,。該點(diǎn)應(yīng)距離底部和左側(cè)邊緣約0.5-1厘米,直徑1-2毫米,。
4.將薄層色譜TLC板放在容器中,。不要移動或打擾板或TLC容器,因為這會導(dǎo)致溶劑中的波紋和溶劑的不規(guī)則,。當(dāng)溶劑前端距離板頂部0.5-1 cm時,,用鑷子小心地從容器中取出板。
5.讓溶劑蒸發(fā),。將板旋轉(zhuǎn)90°,,使原始樣品點(diǎn)位于右下角。組分斑點(diǎn)將沿著板的底部形成水平線,。
6.將TLC板放回容器中,。當(dāng)溶劑前端距離板頂部0.5-1 cm時,用鑷子小心地從容器中取出板,。
7.讓板上的溶劑蒸發(fā),,然后使用UV燈或高錳酸鉀浸漬使板可視化。
8.用鉛筆標(biāo)記所有斑點(diǎn)的位置,。從樣品被點(diǎn)樣的角落,,通過樣品點(diǎn),到對面的角落畫一條對角線,。在二氧化硅上穩(wěn)定的化合物將出現(xiàn)在對角線上,。如果化合物在二氧化硅上分解,其斑點(diǎn)將低于對角線,。
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