一．硅膠基質(zhì)填料：

1.正相色譜

正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica）以及其它具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)（NH2,APS）和氰基團(tuán)（CN,CPS）的鍵合相填料,。

由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其它極性基團(tuán)極性較強(qiáng)，因此,，分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小,，即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。

正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,，如：正己烷（Hexane）,、氯仿（Chloroform）、二氯甲烷（Methylene Chloride）等,。

2.反相色譜

反相色譜用的填料常是以硅膠為基質(zhì),，表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),，通常為水,、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物,。

樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組份zui先被沖洗出,，而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。

常用的反相填料有：C18(ODS),、C8(MOS),、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等,。

二. 聚合物填料

聚合物填料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸酯等,，其主要優(yōu)點(diǎn)是在pH值為1～14均可使用。

相對(duì)于硅膠基質(zhì)的C18填料,，這類填料具有更強(qiáng)的疏水性,；大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。

現(xiàn)有的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,，色譜柱柱效較低,。

三．其它無(wú)機(jī)填料

其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化,。由于其特殊的性質(zhì)，一般于特殊的用途,。如,，石墨化碳正逐漸成為反相色譜柱填料。這種填料的分離不同于硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),，不再需其它的表面改性。該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),。石墨化碳可用于分離某些幾何異構(gòu)體,又由于在HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解, 這類柱可在任何pH與溫度下使用,。 氧化鋁也可用于HPLC,氧化鋁微粒剛性強(qiáng)，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,，其優(yōu)點(diǎn)是可在pH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用,。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定的限制,，所以未能廣泛應(yīng)用,。新型氧化鋯基質(zhì)色譜填料也可用于HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用pH范圍1～14,，溫度可達(dá)100℃,。由于氧化鋯填料是zui近幾年才開(kāi)始研究，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,，其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中,。